Kelebihan dan Kelemahan Mikroskopi Pengimbasan Laser Multiphoton
Mikroskopi pengimbasan laser multifoton ialah kaedah eksperimen berdasarkan teknologi mikroskopi pengimbasan laser, yang menyediakan keupayaan pembahagian optik yang lebih tepat dalam pemerhatian tiga dimensi. Kaedah pengujaan pendarfluor multifoton menggunakan cahaya merah panjang gelombang panjang atau cahaya inframerah dekat untuk mengumpul imej pendarfluor resolusi tinggi spesimen, yang mempunyai kerosakan minimum pada spesimen hidup, jadi ia sesuai untuk pengimejan sel hidup, terutamanya untuk tisu hidup yang tebal seperti hirisan otak, embrio, Kajian pengimejan keseluruhan organ atau bahkan keseluruhan organisma.
Kelebihannya adalah seperti berikut:
1. Teruja oleh cahaya merah atau cahaya inframerah, penyerakan cahaya adalah kecil (penyerakan zarah-zarah kecil adalah berkadar songsang dengan kuasa keempat panjang gelombang).
2. Tidak perlu lubang jarum, dan lebih banyak foton bertaburan dari bahagian pengimejan boleh dikumpulkan.
3. Lubang jarum tidak dapat membezakan foton bertaburan yang dipancarkan daripada kawasan luar fokus atau kawasan fokus, dan nisbah isyarat-ke-bunyi bagi pengimejan berbilang foton dalam lapisan dalam adalah baik.
4. Cahaya ultraungu atau boleh dilihat yang digunakan untuk pengujaan foton tunggal mudah diserap dan dilemahkan oleh sampel sebelum pancaran mencapai satah fokus, dan ia tidak mudah untuk merangsang lapisan dalam.
5. Dari segi pemerhatian mikroskop biologi, pertimbangan pertama adalah untuk tidak merosakkan keadaan aktif organisma itu sendiri, dan untuk mengekalkan peredaran air, kepekatan ion, oksigen dan nutrien. Dalam kes pemerhatian cahaya, kedua-dua tenaga haba dan foton mesti kekal dalam jumlah penyinaran dan tenaga cahaya yang tidak akan merosakkan sel.
6. Mikroskopi multifoton juga mempunyai banyak kelebihan. Seperti resolusi tiga dimensi, penembusan dalam, kecekapan serakan, cahaya latar belakang, nisbah isyarat-ke-bunyi, kawalan, dan lain-lain, terdapat ciri-ciri unggul yang tidak dimiliki atau tidak ada pada mikroskop laser pada masa lalu.
Mikroskopi pengimbasan laser confocal multiphoton telah diperluaskan ke pelbagai bidang penyelidikan dan aplikasi. Ia boleh melakukan pemerhatian tiga dimensi tidak merosakkan sampel dalam keadaan semula jadi, dan boleh meningkatkan resolusi dan nisbah isyarat kepada bunyi sistem. Menggunakan bahan pengujaan multifoton Ia juga boleh merealisasikan penyimpanan data ketinggian tiga dimensi dan mikrofabrikasi arah sewenang-wenangnya tiga dimensi, yang mempunyai nilai aplikasi yang tinggi. Adalah dipercayai bahawa dengan perkembangan selanjutnya mesin, bahan, dan teknologi laser yang berkaitan dengan mikroskop confocal multiphoton, akan terdapat lebih banyak mikroskop pengimbasan laser confocal Photon akan mendapat pembangunan yang lebih besar dan aplikasi yang lebih luas.
Kelemahannya adalah seperti berikut:
1. Hanya untuk pengimejan pendarfluor.
2. Jika sampel termasuk kromofor yang boleh menyerap cahaya pengujaan, seperti pigmen, sampel mungkin rosak secara haba.
3. Resolusi berkurangan sedikit. Walaupun ia boleh diperbaiki dengan menggunakan apertur confocal pada masa yang sama, isyarat akan hilang.
4. Oleh kerana pengehadan laser ultrafast yang mahal, kos mikroskop pengimbasan multifoton agak tinggi.
