Kaedah dan langkah penyahpepijatan untuk mikroskopi kontras fasa
a. Atas dasar melaraskan sistem pencahayaan Kuhler, gunakan kaedah medan terang untuk memfokuskan sampel dengan jelas;
b. Putar lampu sorot ke Ph1 dan selaraskannya dengan garis skala pada meja putar. Pilih objektif kontras fasa 10 x dan gantikannya dengan sampel lutsinar untuk diperhatikan;
c. Tanggalkan salah satu kanta mata, gantikannya dengan teleskop tengah, dan fokus pada dua gelang kontras dalam bidang pandangan (gelang kontras hitam bagi kanta objektif dan gelang kontras pemancaran kanta pemeluwap);
d. Dua cincin perbezaan dalam bidang pandangan mungkin tidak semestinya bertepatan. Laraskan dua peranti pelarasan pada lampu sorot (melaraskan kedudukan kiri dan kanan gelang beza dengan rod pelarasan dan tombol jenis geseran untuk melaraskan kedudukan hadapan dan belakang), supaya gelang lutsinar bergerak ke depan dan ke belakang bertepatan dengan gelang hitam ;
e. Selepas pelarasan, tukar semula ke kanta mata pemerhatian dan tekan penapis hijau ke dalam laluan optik untuk memerhati imej perbezaan fasa sampel;
f. Apabila memerhati dengan kanta objektif 20 x dan 40 x, lampu sorot hendaklah ditetapkan pada kedudukan Ph2, dan apabila menggunakan kanta objektif 100 x, lampu sorot hendaklah ditetapkan pada kedudukan Ph3.
Skop penggunaan: Sesuai untuk memerhati sampel lutsinar, tidak bernoda atau tidak bernoda, seperti pelbagai sel, tisu hidup, hirisan tisu tidak bernoda atau tidak bernoda, organisma akuatik, dsb.
Prinsip asas mikroskop kontras fasa
Apabila cahaya melalui spesimen yang agak telus, tiada perubahan ketara dalam panjang gelombang (warna) dan amplitud (kecerahan) cahaya. Oleh itu, apabila memerhati spesimen yang tidak ternoda (seperti sel hidup) di bawah mikroskop optik biasa, morfologi dan struktur dalaman mereka selalunya sukar untuk dibezakan. Walau bagaimanapun, disebabkan oleh perbezaan indeks biasan dan ketebalan bahagian sel yang berlainan, akan terdapat perbezaan dalam laluan optik cahaya langsung dan difraksi apabila melalui spesimen ini. Apabila laluan optik bertambah atau berkurang, fasa pecutan atau gelombang cahaya ketinggalan akan berubah (mengakibatkan perbezaan fasa). Perbezaan fasa cahaya tidak dapat dirasai oleh mata kasar, tetapi mikroskop perbezaan fasa boleh menggunakan peranti khasnya - apertur bulat dan plat fasa, dan menggunakan fenomena gangguan cahaya untuk mengubah perbezaan fasa cahaya menjadi perbezaan amplitud (perbezaan terang dan gelap) yang boleh dikesan oleh mata manusia. Ini menjadikan objek yang asalnya telus menunjukkan perbezaan terang dan gelap yang jelas, meningkatkan kontras, dan membolehkan kita memerhati dengan jelas sel hidup dan struktur halus tertentu di dalam sel yang tidak boleh dilihat atau dilihat dengan jelas di bawah mikroskop optik biasa dan mikroskop medan gelap.
Prinsip pengimejan mikroskop kontras fasa: Sumber optik hanya boleh melalui gelang lutsinar bukaan bulat, yang kemudiannya difokuskan kepada pancaran cahaya. Apabila pancaran cahaya ini melalui objek yang diuji, ia mengalami tahap sisihan (pembelauan) yang berbeza-beza disebabkan oleh laluan optik yang berbeza bagi setiap bahagian. Disebabkan oleh fakta bahawa imej yang dibentuk oleh cincin lutsinar bertepatan dengan permukaan konjugat pada plat fasa dan satah fokus di belakang kanta objektif. Oleh itu, cahaya langsung yang tidak menyimpang melalui permukaan konjugat, manakala cahaya terbeza yang telah menyimpang melalui permukaan pampasan. Disebabkan oleh sifat berbeza permukaan konjugat dan permukaan pampasan pada plat fasa, mereka masing-masing akan menghasilkan perbezaan fasa tertentu dan pengurangan keamatan cahaya yang melalui kedua-dua bahagian ini. Kedua-dua set cahaya kemudiannya akan menumpu melalui kanta belakang dan bergerak pada laluan optik yang sama, menyebabkan gangguan antara cahaya langsung dan difraksi, menukar perbezaan fasa kepada perbezaan amplitud. Dengan cara ini, semasa mikroskop kontras fasa, perbezaan fasa yang tidak dapat dibezakan oleh mata manusia ditukar kepada perbezaan amplitud (perbezaan kecerahan) yang boleh dibezakan oleh mata manusia melalui cahaya badan lutsinar yang tidak berwarna.
