Mikroskop pendarfluor boleh dibahagikan kepada dua jenis mengikut prinsip laluan optik:
1. Mikroskop pendarfluor penghantaran
Mikroskop pendarfluor yang lebih tua menggunakan perhatian untuk merangsang pendarfluor dengan meluluskan sumber cahaya pengujaan melalui bahan spesimen. Kelebihannya adalah pendarfluor yang kuat pada pembesaran yang rendah, tetapi kelemahannya adalah bahawa pendarfluornya berkurangan dengan peningkatan pembesaran. Oleh itu, ia hanya sesuai untuk mengamati bahan spesimen yang lebih besar.
2. Mikroskop pendarfluor cahaya jatuh
Lampu pengujaan jatuh dari lensa objektif ke permukaan spesimen, menggunakan kanta objektif yang sama seperti kondensor pencahayaan dan kanta objektif untuk mengumpul pendarfluor.
Splitter rasuk warna dua (cermin dichroic) perlu ditambah ke laluan optik, yang membentuk sudut 45 darjah dengan paksi optik. Lampu pengujaan dicerminkan ke dalam lensa objektif dan memberi tumpuan kepada sampel. Pendarfluor yang dihasilkan oleh sampel, serta cahaya pengujaan yang dicerminkan dari permukaan lensa objektif dan kaca penutup, masukkan lensa objektif pada masa yang sama dan kembali ke splitter rasuk warna dua untuk memisahkan cahaya pengujaan dan pendarfluor. Lampu pengujaan sisa kemudian disekat oleh penyerapan penapis. Jika kombinasi penapis pengujaan yang berlainan, pemisah rasuk warna dua, dan penapis menyekat digunakan, mereka dapat memenuhi keperluan produk reaksi pendarfluor yang berbeza.
Kelebihan mikroskop pendarfluor ini adalah pencahayaan medan seragam, pengimejan yang jelas, dan pendarfluor yang lebih kuat dengan pembesaran yang lebih besar.
3. Mikroskop kontras fasa
Mikroskop kontras fasa adalah mikroskop yang boleh menukar perbezaan fasa (atau perbezaan laluan optik) yang dihasilkan apabila cahaya melewati objek ke dalam amplitud (intensiti cahaya) perubahan. Terutamanya digunakan untuk mengamati sel -sel hidup, bahagian tisu yang tidak teratur, atau spesimen yang berwarna tidak mempunyai kontras.
Mata manusia hanya boleh membezakan perubahan dalam panjang gelombang (warna) dan amplitud cahaya yang kelihatan, tetapi tidak dapat membezakan perubahan fasa. Kebanyakan spesimen biologi sangat telus, dan amplitud gelombang cahaya kekal pada dasarnya tidak berubah selepas melewati, dengan hanya perubahan fasa.
Mikroskop kontras fasa pada dasarnya menukarkan perbezaan laluan optik cahaya yang dapat dilihat melalui spesimen ke dalam perbezaan amplitud, dengan itu meningkatkan perbezaan antara pelbagai struktur dan menjadikannya jelas dan kelihatan. Selepas melewati spesimen, cahaya mengalami pembiasan, menyimpang dari laluan optik asal dan ditangguhkan oleh 1/4 λ (panjang gelombang). Sekiranya perbezaan laluan optik meningkat atau menurun dengan 1/4 λ yang lain, perbezaan laluan optik menjadi 1/2 λ, dan gangguan antara kedua -dua rasuk cahaya meningkat atau berkurangan selepas paksi digabungkan, meningkatkan kontras.
