Mikroskopi Pendarfluor Parameter Teknikal Mikroskopi Pendarfluor Teknik dan Kaedah
Parameter Teknikal Mikroskop Pendarfluor 1. Kanta mata sudut lebar 2. Kanta objektif akromatik 3. Penukar kanta objektif empat lubang 4. Peranti epi-pendarfluor Sistem pengujaan Biru (B) Hijau (G) 10Lampu merkuri 0W 5. Mekanisme pelarasan fokus kasar dan halus sepaksi: pelarasan Julat fokus: 15mm Nilai grid pergerakan mikro: 0.002mm 6. Meja mekanikal dua lapisan Julat pergerakan membujur: 70mm Julat pergerakan sisi: 50mm
Parameter teknikal mikroskop pendarfluor
1. kanta mata sudut lebar
2. Kanta objektif akromatik
3. lubang hidung empat bukaan
4. Peranti epi-pendarfluor biru (B) hijau (G) sistem pengujaan lampu merkuri 100W
5. Mekanisme pelarasan fokus kasar dan halus sepaksi: julat fokus 15mm nilai grid pergerakan halus 0.002mm
6. Meja kerja mekanikal dua lapisan
Julat pergerakan menegak: 70 mm Julat pergerakan sisi: 50 mm
Kemahiran dan Kaedah Mikroskopi Pendarfluor
(1) Slaid kaca
Ketebalan slaid kaca hendaklah antara 0.8 dan 1.2mm. Slaid yang terlalu tebal akan menyerap lebih banyak cahaya pada satu tangan, dan sebaliknya, cahaya pengujaan tidak boleh tertumpu pada spesimen. Slaid mestilah licin, ketebalan seragam, dan bebas daripada pendarfluor yang jelas. Kadangkala slaid kaca kuarza digunakan.
(2) Kaca penutup
Ketebalan kaca penutup adalah kira-kira 0.17mm, licin. Untuk menguatkan cahaya pengujaan, kaca penutup gangguan juga boleh digunakan, iaitu kaca penutup khas yang disalut dengan beberapa lapisan bahan (seperti magnesium fluorida) yang mempunyai kesan gangguan yang berbeza pada cahaya dengan panjang gelombang yang berbeza, yang boleh membuat pendarfluor berjalan dengan lancar. Cahaya mengujakan dilalui dan dipantulkan, dan cahaya pengujaan yang dipantulkan ini mengujakan spesimen.
(3) Spesimen
Potongan tisu atau spesimen lain tidak boleh terlalu tebal. Jika terlalu tebal, kebanyakan cahaya pengujaan akan digunakan di bahagian bawah spesimen, manakala bahagian atas yang diperhatikan secara langsung oleh kanta objektif tidak akan teruja sepenuhnya. Di samping itu, pertindihan sel atau penutup kekotoran, menjejaskan penghakiman.
(4) Ejen pelekap
Gliserin biasanya digunakan sebagai ejen pelekap, yang mesti tiada pendarfluor auto, tidak berwarna dan lutsinar, dan kecerahan pendarfluor lebih cerah pada pH 8.5-9.5, dan ia tidak mudah pudar dengan cepat. Oleh itu, campuran gliserol dan 0.5mol/l larutan penimbal karbonat yang sama dengan pH 9.0 hingga 9.5 biasanya digunakan sebagai agen pelekap.
(5) minyak cermin
Secara amnya, apabila memerhati spesimen dengan mikroskop pendarfluor medan gelap dan kanta rendaman minyak, minyak rendaman mesti digunakan. Sebaiknya gunakan minyak rendaman bukan pendarfluor khas. Gliserin di atas juga boleh digunakan sebagai gantinya, dan parafin cecair juga boleh digunakan, tetapi indeks biasannya rendah, yang mempunyai sedikit kesan pada kualiti imej. Pengaruh.
Prinsip dan ciri-ciri struktur mikroskop pendarfluor
Mikroskopi pendarfluor menggunakan titik dengan kecekapan bercahaya tinggi untuk memancarkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu (seperti cahaya ultraungu 3650 in atau cahaya biru ungu 4200 in) melalui sistem penapis sebagai cahaya pengujaan untuk mengujakan bahan pendarfluor dalam spesimen untuk mengeluarkan pendarfluor pelbagai warna Selepas itu, perhatikan melalui pembesaran kanta objektif dan kanta mata. Dengan cara ini, di bawah latar belakang kontras yang kuat, walaupun pendarfluor sangat lemah, ia mudah dikenal pasti dan mempunyai sensitiviti yang tinggi. Ia digunakan terutamanya untuk penyelidikan struktur dan fungsi sel dan komposisi kimia. Struktur asas mikroskop pendarfluor terdiri daripada mikroskop optik biasa serta beberapa aksesori (seperti sumber cahaya pendarfluor, penapis pengujaan, pembahagi rasuk dua warna dan penapis penyekat, dsb.). Sumber cahaya pendarfluor—biasanya menggunakan lampu merkuri tekanan ultra tinggi (50-200W), yang boleh memancarkan cahaya pelbagai panjang gelombang, tetapi setiap bahan pendarfluor mempunyai panjang gelombang pengujaan yang menghasilkan pendarfluor terkuat, jadi penapis pengujaan ( Umumnya, terdapat penapis pengujaan ultraungu, ungu, biru dan hijau), yang hanya membenarkan cahaya pengujaan panjang gelombang tertentu melalui dan menyinari spesimen, sambil menyerap cahaya lain. Selepas setiap bahan disinari oleh cahaya pengujaan, ia memancarkan pendarfluor yang boleh dilihat dengan panjang gelombang yang lebih panjang daripada panjang gelombang penyinaran dalam masa yang sangat singkat. Pendarfluor adalah khusus dan umumnya lebih lemah daripada cahaya pengujaan. Untuk melihat pendarfluor tertentu, penyekatan (atau penindasan) mesti ditambah di belakang kanta objektif dan digunakan bersama dengannya.
Perbezaan antara mikroskop pendarfluor dan mikroskop biasa
1. Kaedah pencahayaan biasanya episkopik, iaitu, sumber cahaya ditayangkan pada sampel melalui kanta objektif;
2. Sumber cahaya adalah cahaya ultraungu, panjang gelombang lebih pendek, dan resolusi lebih tinggi daripada mikroskop biasa;
3. Terdapat dua penapis khas, satu di hadapan sumber cahaya digunakan untuk menapis cahaya yang boleh dilihat, dan satu di antara kanta mata dan kanta objektif digunakan untuk menapis sinar ultraviolet untuk melindungi mata manusia.
Mikroskop pendarfluor juga merupakan sejenis mikroskop optik, perbezaan utama ialah panjang gelombang pengujaan kedua-duanya berbeza. Ini menentukan perbezaan antara mikroskop pendarfluor dan mikroskop optik biasa dari segi struktur dan penggunaan.
Mikroskopi pendarfluor ialah alat penting dalam sitokimia imunofluoresen. Ia terdiri daripada komponen utama seperti sumber cahaya, sistem plat penapis dan sistem optik. Ia adalah untuk menggunakan panjang gelombang cahaya tertentu untuk merangsang spesimen untuk mengeluarkan pendarfluor, dan untuk memerhati imej pendarfluor spesimen dengan menguatkan kanta objektif dan sistem kanta mata.
