Kaedah pengimejan untuk medan terang dan gelap mikroskop pendarfluor
(1) Pengimejan medan terang (BFI), yang hanya membenarkan elektron yang dihantar di kawasan paraxial melalui apertur objektif, membentuk imej gelap pada latar belakang yang terang. Lebih kecil apertur kanta objektif, lebih besar kontras imej medan terang; (2) Pengimejan medan gelap (DFI), yang hanya membenarkan sebahagian daripada rasuk berselerak sudut besar atau rasuk pembelauan kristal untuk melalui apertur kanta objektif, sambil menghalang rasuk yang dihantar. Ini menghasilkan imej grafik yang terang pada latar belakang gelap. Kaedah pengimejan medan gelap ini boleh meningkatkan kontras imej dan merupakan kaedah pengimejan yang penting.
Terdapat kira-kira empat kaedah untuk mikroskop pendarfluor untuk mencapai pengimejan medan gelap: (1) mengekalkan pencahayaan menegak di sepanjang paksi optik sambil menggerakkan apertur objektif; (2) Penggunaan pencahayaan serong untuk mendapatkan rasuk bertaburan dalam arah paksi optik dipanggil Pengimejan Medan Gelap Pusat (CDFI); (3) Apertur kanta objektif dengan penghalang rasuk pusat dan kawasan lutsinar bulat; (4) Gunakan lampu sorot lutsinar bulat untuk mengesan cahaya dan apertur objektif dengan lubang bulat tengah. Kaedah * di sini adalah mudah dan mudah, tetapi ia menggunakan pengimejan elektronik di kawasan lengan jauh, mengakibatkan penyimpangan yang besar dan kualiti imej yang buruk. Kaedah kedua boleh mengelakkan kelemahan di atas, tetapi apertur objektif mikroskop pendarfluor Leica hanya menerima sebahagian kecil elektron terbias yang bertaburan, menyebabkan kecekapan yang lebih rendah. Bahagian tepi apertur sering dihujani oleh sejumlah besar elektron, yang boleh menyebabkan pencemaran asimetri dan menjejaskan kualiti imej dengan mudah. Objektif pekeliling telah diperbaiki dalam hal ini, tetapi kelemahannya ialah ia sukar dibuat dan sukar untuk mencapai simetri paksi lengkap. Memandangkan keperluan yang agak santai untuk sistem pencahayaan, penyelesaian terakhir boleh diguna pakai, yang melibatkan penambahan apertur bulat pada pemeluwap untuk memberikan pencahayaan berongga untuk sampel. Kesan peranti ini. Peleraian imejnya boleh hampir dengan imej medan terang, manakala kontrasnya bertambah baik.
