Kelebihan mikroskop multifoton pengimbasan laser yang lebih baik
Mikroskop multifoton pengimbasan laser adalah penambahbaikan penting mikroskop optik, yang terutamanya menunjukkan bahawa ia boleh memerhati struktur dalam sel hidup, sel tetap dan tisu, dan boleh mendapatkan struktur satah Z berbilang lapisan yang jelas dan tajam, iaitu kepingan optik. , yang boleh digunakan untuk membina struktur pepejal tiga dimensi spesimen. Mikroskop konfokal menggunakan sumber cahaya laser, yang mengisi keseluruhan satah fokus belakang kanta objektif selepas pengembangan, dan kemudian melalui sistem kanta kanta objektif untuk menumpu ke titik yang sangat kecil pada satah fokus spesimen. Mengikut apertur berangka kanta objektif, diameter titik pencahayaan paling terang ialah kira-kira 0.25 ~ 0.8μm dan kedalaman kira-kira 0.5 ~ 1.5 μm .. Saiz fokus kopolimerisasi bergantung pada reka bentuk mikroskop, panjang gelombang laser, ciri kanta objektif, tetapan keadaan unit pengimbasan dan sifat spesimen. Julat pencahayaan dan kedalaman mikroskop medan adalah sangat besar, manakala pencahayaan mikroskop confocal tertumpu pada tumpuan * * pada satah fokus. Kelebihan paling asas mikroskop confocal ialah ia boleh membuat hirisan optik halus spesimen pendarfluor tebal (yang boleh mencapai 50 μm atau lebih), dan ketebalan hirisan adalah kira-kira 0.5 hingga 1.5 μm. Satu siri imej hirisan optik boleh diperoleh dengan menggerakkan spesimen ke atas dan ke bawah oleh motor pijak paksi-Z mikroskop. Pemerolehan maklumat imej dikawal dalam satah pertama dan tidak akan diganggu oleh isyarat dari kedudukan lain pada spesimen. Selepas mengalih keluar pengaruh pendarfluor latar belakang dan meningkatkan nisbah isyarat kepada hingar, kontras dan resolusi imej confocal jelas bertambah baik berbanding imej pendarfluor pencahayaan medan tradisional. Dalam banyak spesimen, banyak komponen struktur yang rumit dijalin untuk membentuk sistem yang kompleks, tetapi apabila bahagian optik yang mencukupi dapat dikumpulkan, kita boleh membina semula mereka dalam tiga dimensi melalui perisian. Kaedah eksperimen ini telah digunakan secara meluas dalam penyelidikan biologi untuk menjelaskan hubungan struktur dan fungsi yang kompleks antara sel atau tisu.
