Pengenalan kepada beberapa pengetahuan tentang mikroskop optik
Alat atau peranti yang membesarkan objek kecil atau bahagian kecil objek pada pembesaran tinggi untuk pemerhatian. Ia digunakan secara meluas dalam pengeluaran perindustrian dan pertanian dan penyelidikan saintifik. Ahli biologi dan pekerja perubatan juga banyak menggunakan mikroskop dalam perniagaan mereka. Secara meluas dibahagikan kepada mikroskop optik dan mikroskop elektron.
Mikroskop optik ialah mikroskop yang menggunakan cahaya nampak sebagai sumber cahaya. Mikroskop optik biasa boleh dibahagikan kepada dua bahagian: sistem optik dan peranti mekanikal. Sistem optik terutamanya termasuk kanta mata, kanta objektif, pemeluwap, diafragma dan sumber cahaya. Peranti mekanikal terutamanya termasuk tong kanta, lajur cermin, pentas, tapak cermin, skru pelarasan ketebalan dan bahagian lain (Rajah 1). Prinsip asas optiknya ditunjukkan dalam Rajah 2. Kanta cembung kecil di sebelah kiri dalam rajah mewakili sekumpulan kanta dengan jarak fokus pendek, dipanggil kanta objektif. Kanta cembung besar di sebelah kanan mewakili sekumpulan kanta dengan jarak fokus yang panjang, dipanggil kanta mata. Objek yang akan diperhatikan (AB) diletakkan di luar titik fokus (f1) kanta objektif. Cahaya daripada objek membentuk imej nyata yang diperbesarkan terbalik (B'A') sedikit di dalam fokus kanta mata (f2) selepas melalui kanta objektif. Mata pemerhati membesarkan lagi imej sebenar (B'A') menjadi imej maya terbalik (B"A") melalui kanta mata.
Kanta mata terletak di atas laras mikroskop dan umumnya terdiri daripada dua kanta cembung. Selain mengembangkan lagi imej sebenar yang dibentuk oleh kanta objektif, ia juga mengehadkan bidang pandangan yang diperhatikan oleh mata. Mengikut pembesaran, terdapat tiga jenis kanta mata yang biasa digunakan: 5 kali, 10 kali dan 15 kali.
Kanta objektif biasanya terletak di bawah laras mikroskop, berhampiran dengan objek yang diperhatikan. Ia terdiri daripada 8 hingga 10 kanta. Fungsinya adalah untuk membesarkan (membuat imej sebenar yang diperbesarkan untuk objek), yang kedua adalah untuk memastikan kualiti imej, dan yang ketiga adalah untuk meningkatkan resolusi. Kanta objektif yang biasa digunakan boleh dibahagikan kepada pembesaran rendah (4×), pembesaran sederhana (10× atau 20×), pembesaran tinggi (40×) dan kanta objektif rendaman minyak (100×) mengikut pembesaran. Kanta objektif berbilang dipasang pada roda penukar cermin, dan kanta objektif dengan gandaan berbeza boleh dipilih dengan memutarkan meja putar mengikut keperluan.
Pembesaran mikroskop ialah gandaan kanta mata didarab dengan objektif. Sebagai contoh, jika kanta mata adalah 10 kali dan kanta objektif adalah 40 kali, pembesaran ialah 40 × 10 kali (pembesaran 400 kali). Mikroskop yang baik boleh membesarkan 2000 kali dan boleh membezakan dua titik 1×10-5sm.
Apabila cahaya putih melalui kanta cembung, cahaya dengan panjang gelombang yang lebih pendek (biru-ungu) mempunyai pembiasan yang lebih besar daripada cahaya dengan panjang gelombang yang panjang (merah-oren). Oleh itu, apabila pengimejan, terdapat pelbagai spektrum di sekeliling imej, dan terdapat bulatan cahaya biru atau merah. Kecacatan warna ini dipanggil penyimpangan kromatik. Disebabkan oleh sudut yang berbeza di mana cahaya memasuki (dan keluar) pelbagai bahagian permukaan kanta, cahaya yang melalui pinggir kanta dibiaskan pada sudut yang lebih besar daripada cahaya yang melalui pusat kanta. Oleh itu, imej kabur dan herot muncul di sekeliling lilitan imej semasa pengimejan. Kecacatan kelengkungan permukaan pengimejan ini dipanggil penyimpangan sfera. Satu siri kumpulan kanta cembung dan cekung dengan bentuk, struktur dan jarak yang berbeza bekerjasama antara satu sama lain untuk membetulkan penyimpangan kromatik dan penyimpangan sfera ke tahap yang paling besar, membentuk imej yang terang, jelas dan tepat. Inilah sebabnya mengapa kanta mata atau kanta objektif terdiri daripada satu set kanta masing-masing. Kanta sedemikian dipanggil achromat pelan.
Apabila cahaya dipancarkan dari satu medium (seperti udara) ke medium lain yang lebih tumpat (seperti kaca), ia akan membengkok ke "garis biasa" (garis berserenjang dengan antara muka medium), seperti garisan BOA dalam Rajah. 3. Apabila cahaya masuk dari medium tumpat (kaca) ke dalam medium tidak tumpat (udara), ia akan menyimpang daripada "garis biasa", seperti garisan AOB (Rajah 3a). Apabila cahaya melalui kaca pemeluwap (indeks biasan 1.51) dan memasuki udara, ia juga akan menyimpang dan membias ke luar, jadi jumlah cahaya yang memasuki kanta objektif berkurangan dengan banyak, dan resolusi imej juga berkurangan. Apabila menggunakan kanta objektif 100x, jika minyak diisi antara kanta objektif dan kaca penutup (indeks biasan juga 1.51) untuk mengasingkan udara, cahaya boleh memasuki kanta objektif hampir tanpa pembiasan, yang meningkatkan kecerahan dan resolusi gambar itu . Objektif tersebut dipanggil objektif rendaman minyak (Rajah 3b).
Pemeluwap terletak di bawah peringkat mikroskop, yang boleh menumpu cahaya dari sumber cahaya, menumpukan cahaya pada spesimen, dan menjadikan spesimen sama rata dengan keamatan cahaya sederhana. Hujung bawah pemeluwap dilengkapi dengan hentian apertur (diafragma) untuk mengawal ketebalan rasuk.
Sumber pencahayaan mikroskop optik biasa terletak di bawah pemeluwap, yang merupakan mentol lampu kuat khas dengan pencahayaan seragam, dan dilengkapi dengan perintang berubah-ubah untuk menukar keamatan cahaya.
Oleh kerana cahaya sumber cahaya mikroskop optik biasa dihantar dari bahagian bawah badan kanta, melalui kanta pemeluwap, kanta objektif, dan mencapai kanta mata, sampel yang akan diperhatikan mesti dipotong menjadi kepingan nipis dengan ketebalan kira-kira. 6 μm yang boleh menghantar cahaya dalam penyelidikan perubatan dan biologi. Dan untuk mengotorkan untuk menunjukkan tisu dan sel yang berbeza dan struktur halus yang lain. Keseluruhan proses pemprosesan dipanggil teknik hirisan tisu konvensional, termasuk memilih bahan tisu yang sesuai, membetulkannya dengan larutan formaldehid (formalin), dehidrasi dengan alkohol langkah demi langkah, memasukkan dalam parafin, memotong tisu menjadi kepingan nipis dengan mikrotom dan memasangnya. pada slaid kaca, dan kemudian Selepas pewarnaan dengan pewarna hematoxylin-eosin, slaid tisu akhirnya dipasang dalam gam resin optik. Slaid tisu yang disediakan boleh disimpan untuk masa yang lama.
Kanta mata dan kanta objektif mikroskop dipasang pada kedua-dua hujung laras kanta, dan jaraknya ditetapkan. Letakkan gelongsor tisu di atas pentas, dan putar skru pelarasan kasar untuk mendekatkan pentas dengan kanta objektif. Potongan tisu memasuki satah fokus kanta objektif, dan imej tisu dalam spesimen boleh dilihat pada kanta mata. Kemudian gunakan skru pelarasan halus untuk menjadikan imej dalam kanta mata jelas untuk diperhatikan. Apabila menukar pembesaran, kanta mata atau kanta objektif mesti diganti.
