Pengenalan kepada peningkatan kelebihan laser pengimbasan mikroskopi multiphoton
Mikroskop multiphoton pengimbasan laser adalah peningkatan mikroskopi optik yang ketara, terutamanya yang ditunjukkan dalam keupayaan untuk memerhatikan struktur sel-sel hidup, sel tetap, dan tisu yang jelas dan tajam. Mikroskop confocal menggunakan sumber cahaya laser, yang diperluas untuk mengisi keseluruhan satah fokus lensa objektif, dan kemudian menumpu ke dalam titik -titik yang sangat kecil pada satah fokus spesimen melalui sistem lensa lensa objektif. Menurut aperture berangka lensa objektif, diameter titik pencahayaan terang adalah kira -kira 0. 25-0. 8 μ m, dan kedalaman adalah kira -kira 0. 5-1 Saiz titik confocal ditentukan oleh reka bentuk mikroskop, panjang gelombang laser, ciri -ciri objektif, pengimbasan tetapan keadaan unit, dan sifat spesimen. Julat pencahayaan dan kedalaman mikroskop medan adalah besar, sementara pencahayaan mikroskop konfokal difokuskan pada titik fokus pada satah fokus. Kelebihan asas mikroskopi confocal adalah bahawa ia boleh melakukan seksyen optik halus pada spesimen pendarfluor tebal (sehingga 5 0 μ m atau lebih), dengan ketebalan kira -kira 0.5 hingga 1.5 μ m. Siri imej kepingan optik boleh diperolehi dengan menggerakkan spesimen ke atas dan ke bawah menggunakan motor stepper z-paksi mikroskop. Pengumpulan maklumat imej dikawal dalam pesawat * *, tanpa gangguan dari isyarat yang dipancarkan dari kedudukan lain pada spesimen. Selepas mengeluarkan pengaruh pendarfluor latar belakang dan meningkatkan nisbah isyarat-ke-bunyi, kontras dan resolusi imej confocal meningkat dengan ketara berbanding dengan imej pendarfluor pencahayaan medan tradisional. Dalam banyak spesimen, komponen struktur rumit yang saling berkaitan untuk membentuk sistem yang kompleks, tetapi apabila bahagian optik yang cukup dapat dikumpulkan, kita boleh menggunakan perisian untuk membina semula mereka dalam tiga dimensi. Kaedah eksperimen ini telah digunakan secara meluas dalam penyelidikan biologi untuk menjelaskan hubungan struktur dan fungsi kompleks antara sel atau tisu.
