Pengetahuan tentang Mikroskopi Pendarfluor Konfokal
Prinsip asas mikroskop pendarfluor confocal: sumber cahaya titik digunakan untuk menyinari spesimen, dan titik cahaya kecil yang jelas terbentuk pada satah fokus. terdiri daripada pembahagi. Pembahagi rasuk menghantar pendarfluor terus ke pengesan. Terdapat lubang jarum di hadapan sumber cahaya dan pengesan, masing-masing dipanggil lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pengesan. Saiz geometri kedua-duanya adalah sama, kira-kira 100-200nm; berbanding dengan titik cahaya pada satah fokus, kedua-duanya adalah konjugat, iaitu, titik cahaya melalui satu siri kanta, dan akhirnya boleh difokuskan pada lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pengesanan pada masa yang sama. Dengan cara ini, cahaya dari satah fokus boleh menumpu dalam skop lubang pengesanan, manakala cahaya yang berselerak dari atas atau bawah satah fokus disekat di luar lubang pengesanan dan tidak boleh diimej. Laser mengimbas titik sampel demi titik, dan tiub photomultiplier selepas mengesan lubang jarum juga memperoleh imej confocal bagi titik titik cahaya yang sepadan dengan titik, yang ditukar menjadi isyarat digital dan dihantar ke komputer, dan akhirnya diagregatkan menjadi jelas. imej confocal bagi keseluruhan satah fokus pada skrin.
Setiap imej satah fokus sebenarnya adalah keratan rentas optik spesimen, dan keratan rentas optik ini sentiasa mempunyai ketebalan tertentu, juga dikenali sebagai keratan nipis optik. Oleh kerana keamatan cahaya pada titik fokus adalah jauh lebih besar daripada pada titik bukan fokus, dan cahaya satah bukan fokus ditapis oleh lubang jarum, kedalaman medan sistem confocal adalah lebih kurang sifar, dan mengimbas sepanjang Z. -paksi boleh merealisasikan tomografi optik, membentuk Perhatikan bahagian optik dua dimensi di tempat fokus sampel. Menggabungkan pengimbasan satah XY (satah fokus) dengan pengimbasan paksi Z (paksi optik), imej tiga dimensi sampel boleh diperoleh dengan mengumpul imej dua dimensi lapisan berterusan dan diproses oleh perisian komputer khas.
