Kebaikan dan keburukan mikroskopi pengimbasan laser multifoton
Mikroskopi Pengimbasan Laser Berbilang Foto ialah kaedah percubaan berdasarkan teknologi mikroskop pengimbasan laser, yang memberikan lebih **keupayaan pembahagian optik dalam pemerhatian 3D. Kaedah pengujaan pendarfluor multifoton menggunakan panjang gelombang panjang cahaya merah atau inframerah dekat untuk memperoleh imej pendarfluor resolusi tinggi spesimen dengan pembunuhan minimum spesimen aktif, menjadikannya sesuai untuk pengimejan sel hidup, terutamanya tisu hidup tebal seperti hirisan otak, embrio, keseluruhan organ dan juga keseluruhan organisma.
Kelebihan adalah seperti berikut:
1, penggunaan cahaya merah atau pengujaan cahaya inframerah, penyebaran cahaya adalah kecil(taburankecilzarah dan panjang gelombang kuasa keempat nisbah songsang).
2, tidak memerlukan lubang jarum, boleh mengumpul lebih banyak foton bertaburan dari keratan rentas pengimejan.
3, lubang jarum tidak dapat membezakan antara foton bertaburan yang dipancarkan oleh kawasan luar fokus atau kawasan fokus, berbilang foton dalam nisbah isyarat-ke-bunyi pengimejan dalam adalah baik.
4, satu-foton pengujaan ultraviolet atau cahaya yang boleh dilihat digunakan dalam rasuk untuk mencapai satah fokus sebelum sampel mudah diserap dan dilemahkan, tidak mudah untuk pengujaan mendalam.
5, dalam pemerhatian mikroskop biologi, * pertimbangan pertama adalah untuk tidak merosakkan keadaan aktif organisma itu sendiri, untuk mengekalkan air, kepekatan ion, oksigen dan peredaran nutrien. Dalam keadaan pemerhatian cahaya, kedua-dua tenaga haba dan foton mesti kekal di dalam sel tanpa merosakkan jumlah penyinaran, tenaga cahaya.
6, mikroskop berbilang foton juga mempunyai banyak kelebihan. Seperti resolusi tiga dimensi, pencerobohan kedalaman, dalam kecekapan hamburan, cahaya latar belakang, nisbah isyarat-ke-bunyi, kawalan, dan lain-lain, terdapat mikroskop laser sebelumnya tidak mempunyai atau mempunyai tiada tandingan melebihi ciri-ciri.
Mikroskop pengimbasan laser confocal berbilang foton telah diperluaskan kepada pelbagai bidang penyelidikan dan aplikasi. Ia mampu memerhatikan sampel tanpa merosakkan tiga dimensi dalam keadaan semula jadinya, dan boleh meningkatkan resolusi dan nisbah isyarat kepada bunyi sistem. Menggunakan perubahan sifat bahan selepas pengujaan berbilang foton, ia juga mungkin untuk mencapai penyimpanan data ketinggian tiga dimensi dan mikrofabrikasi tiga dimensi dalam sebarang arah, yang mempunyai nilai aplikasi yang tinggi. Ia boleh dipercayai bahawa dengan pembangunan selanjutnya mesin, bahan, teknologi laser dan teknologi lain yang berkaitan dengan mikroskop multifoton confocal, mikroskop pengimbasan laser confocal multiphoton akan menjadi pembangunan yang lebih besar dan aplikasi yang lebih luas.
Kelemahan adalah seperti berikut:
1, hanya pengimejan pendarfluor.
2, jika sampel termasuk kromofor yang boleh menyerap cahaya pengujaan, sepertipigmen, sampelmungkin rosak secara haba.
3, resolusi dikurangkan sedikit, walaupunia boleh diperbaiki dengan penggunaan serentak apertur konfokal, tetapiakan ada kehilangan isyarat.
4. Kos mikroskop pengimbasan multifoton adalah tinggi disebabkan oleh pengehadan laser ultrafast yang mahal.
