Keperluan untuk penghasilan spesimen mikroskop pendarfluor
（1） Slaid kaca
Ketebalan slaid hendaklah antara 0.8 dan 1.2mm. Jika slaid terlalu tebal, di satu pihak, ia menyerap lebih banyak cahaya, dan sebaliknya, ia tidak boleh menyebabkan cahaya pengujaan berkumpul pada spesimen. Slaid mestilah licin, ketebalan seragam, dan bebas daripada pendarfluor spontan yang jelas. Kadangkala slaid kaca kuarza diperlukan.
（2） Penutup kaca slaid
Ketebalan kaca penutup adalah kira-kira 0.17mm, yang licin dan bersih. Untuk meningkatkan pengujaan, kaca penutup gangguan juga boleh digunakan. Ini ialah kaca penutup yang direka khas dengan beberapa lapisan bahan (seperti magnesium fluorida) yang mempunyai kesan gangguan berbeza pada panjang gelombang cahaya yang berbeza. Ia boleh membenarkan pendarfluor lulus dengan lancar, manakala pengujaan pantulan boleh mengujakan spesimen.
（3） Spesimen
Potongan tisu atau spesimen lain tidak boleh terlalu tebal, kerana cahaya pengujaan kebanyakannya digunakan di bahagian bawah spesimen, manakala bahagian atas yang diperhatikan secara langsung oleh kanta objektif tidak teruja sepenuhnya. Di samping itu, pertindihan sel atau penutup kekotoran boleh menjejaskan pertimbangan.
（4） Ejen pengedap
Gliserin biasanya digunakan sebagai agen pelekap, dan ia mestilah bebas daripada pendarfluor spontan, tidak berwarna dan telus. Kecerahan pendarfluor lebih cerah pada pH 8.5~9.5, dan ia tidak mudah pudar dengan cepat. Oleh itu, campuran gliserol dan 0.5mol/l penampan karbonat yang sama pada pH 9.0-9.5 biasanya digunakan sebagai agen pengedap.
（5） Minyak cermin
Apabila memerhati spesimen menggunakan mikroskop pendarfluor medan gelap dan mikroskop minyak, perlu menggunakan minyak kanta. Sebaiknya gunakan minyak kanta bukan pendarfluor yang dibuat khas, yang juga boleh digantikan dengan gliserol seperti yang dinyatakan di atas. Parafin cecair juga boleh digunakan, tetapi indeks biasannya rendah dan mempunyai sedikit kesan pada kualiti imej.
Langkah berjaga-jaga untuk menggunakan mikroskop pendarfluor
(1) Patuhi dengan ketat keperluan manual kilang mikroskop pendarfluor dan jangan ubah atur cara sewenang-wenangnya.
(2) Pemeriksaan hendaklah dijalankan di dalam bilik gelap. Selepas memasuki bilik gelap, sambungkan bekalan kuasa dan nyalakan lampu merkuri tekanan ultra tinggi selama 5 hingga 15 minit. Selepas sumber cahaya memancarkan cahaya yang kuat dan stabil, mata menyesuaikan diri sepenuhnya dengan bilik gelap sebelum mula memerhati spesimen.
(3) Untuk mengelakkan kerosakan UV pada mata, cermin mata pelindung hendaklah dipakai semasa melaraskan sumber cahaya.
(4) Masa pemeriksaan hendaklah 1-2 jam setiap kali. Jika melebihi 90 minit, keamatan cahaya lampu merkuri tekanan ultra tinggi secara beransur-ansur berkurangan dan pendarfluor menjadi lemah; Selepas terdedah kepada sinaran ultraungu selama 3-5 minit, pendarfluor spesimen juga berkurangan dengan ketara; Jadi, ia tidak boleh melebihi 2-3 jam paling banyak.
(5) Jangka hayat sumber cahaya mikroskop pendarfluor adalah terhad, dan spesimen perlu diperiksa secara berpusat untuk menjimatkan masa dan melindungi sumber cahaya. Apabila cuaca panas, kipas elektrik perlu ditambah untuk menghilangkan haba dan menyejukkan. Apabila menggantikan mentol lampu baharu, masa penggunaan hendaklah direkodkan dari awal. Apabila lampu dimatikan dan ingin digunakan semula, ia mesti menunggu mentol sejuk sepenuhnya sebelum dinyalakan. Elakkan menyalakan sumber cahaya beberapa kali.
(6) Perhatikan spesimen sejurus selepas pewarnaan, kerana pendarfluor beransur-ansur berkurangan dari semasa ke semasa. Jika spesimen disimpan dalam beg plastik polietilena pada 4 darjah, ia boleh melambatkan masa pengecilan pendarfluor dan menghalang penyejatan agen pelekap.
(7) Piawaian penghakiman untuk kecerahan pendarfluor secara amnya dibahagikan kepada empat tahap, iaitu "satu" - pendarfluor lemah tidak atau kelihatan. +- Hanya pendarfluor yang boleh dilihat dengan jelas boleh dilihat. ++- Kelihatan dengan pendarfluor terang. '+++' - Pendarfluor yang boleh dilihat dan mempesonakan.
