Contoh kaedah pemprosesan dan langkah-langkah untuk mikroskop elektron
Sebelum menggunakan mikroskop elektron penghantaran untuk memerhati sampel biologi, sampel mesti diproses terlebih dahulu. Para saintis menggunakan kaedah pemprosesan yang berbeza mengikut keperluan penyelidikan yang berbeza.
Penetapan: Untuk mengekalkan spesimen sebanyak mungkin, glutaraldehid digunakan untuk mengeras spesimen dan asid osmik digunakan untuk mengotorkan lemak.
Penetapan sejuk: Sampel dibekukan dengan cepat dalam etana cecair supaya air tidak menghablur dan sebaliknya membentuk ais amorf. Sampel yang dipelihara dengan cara ini mempunyai kerosakan yang lebih sedikit, tetapi kontras imej adalah sangat rendah.
Dehidrasi: Gunakan etanol dan aseton untuk menggantikan air.
Berlapis: Sampel boleh dibahagikan selepas berlapik.
Segmentasi: Sampel dipotong menjadi kepingan nipis menggunakan bilah berlian.
Pewarnaan: Atom berat seperti plumbum atau uranium menyerakkan elektron dengan lebih kuat daripada atom yang lebih ringan dan oleh itu boleh digunakan untuk meningkatkan kontras.
Sebelum menggunakan mikroskop elektron penghantaran untuk memerhati logam, sampel mestilah
Virus di bawah mikroskop elektron
Memotong menjadi kepingan yang sangat nipis (kira-kira 0.1 mm) dan kemudian menggunakan penggilap elektrolitik untuk meneruskan penipisan logam selalunya akan membentuk lubang di tengah sampel di mana elektron boleh melalui logam yang sangat nipis di sana. Logam yang tidak boleh digilap secara elektrolitik atau bahan yang tidak konduktif atau mempunyai kekonduksian yang lemah, seperti silikon, biasanya ditipis secara mekanikal dan kemudian diproses menggunakan hentakan ion. Untuk mengelakkan sampel bukan konduktif daripada terkumpul elektrik statik dalam mikroskop elektron pengimbasan permukaannya mesti ditutup dengan lapisan konduktif.
Mengapakah mikroskop elektron mempunyai resolusi yang lebih tinggi?
Seperti namanya, mikroskop elektron yang dipanggil adalah mikroskop yang menggunakan pancaran elektron sebagai sumber pencahayaan. Oleh kerana rasuk elektron boleh membengkok di bawah tindakan medan magnet luar atau medan elektrik, membentuk fenomena pembiasan yang serupa dengan cahaya yang boleh dilihat melalui kaca, kita boleh menggunakan kesan fizikal ini untuk mencipta "kanta" untuk rasuk elektron, dengan itu membangunkan mikroskop elektron. Ciri mikroskop elektron penghantaran (TEM) ialah kami menggunakan rasuk elektron yang melalui sampel ke imej, yang berbeza daripada mikroskop elektron pengimbasan (Scanning Electron Microscope, SEM). Memandangkan panjang gelombang gelombang elektron jauh lebih kecil daripada panjang gelombang cahaya kelihatan (panjang gelombang 100kV gelombang elektron ialah 0.0037nm, manakala panjang gelombang cahaya ungu ialah 400nm), menurut optik teori, kita boleh menjangkakan bahawa kuasa penyelesaian mikroskop elektron harus jauh lebih baik daripada mikroskop optik. Malah, keupayaan resolusi mikroskop elektron moden telah mencapai 0.1nm. Buku teks elektif fizik untuk pelajar sekolah menengah atas menerangkannya dengan lebih terperinci (maklumat kecil di sebalik kesan fotoelektrik)
