Beberapa mikroskop optik khas dan perbezaannya
1 mikroskop medan gelap
Mikroskop medan gelap tidak mempunyai fungsi memerhati struktur halus di dalam objek, tetapi ia boleh membezakan kewujudan dan pergerakan zarah di atas 0.004 μm. Oleh itu, ia sering digunakan untuk memerhatikan struktur sel hidup dan pergerakan zarah intrasel.
Prinsip asas mikroskop medan gelap ialah kesan Tyndall. Apabila pancaran cahaya melalui bilik gelap, "laluan" habuk terang di udara boleh diperhatikan dari arah yang berserenjang dengan cahaya kejadian. Fenomena ini ialah kesan Tyndall.
Selepas mikroskop medan gelap digantikan dengan pemeluwap medan gelap pada mikroskop optik biasa, disebabkan oleh penyumbatan struktur parabola dalaman pemeluwap, cahaya yang disinari pada permukaan objek yang akan diperiksa tidak boleh terus memasuki kanta objektif dan kanta mata, dan hanya cahaya berselerak boleh melalui, jadi medan pandangan gelap.
Penggunaan asas mikroskop medan gelap adalah seperti berikut:
1. Pasang pemeluwap medan gelap (atau gunakan kertas hitam tebal untuk membuat perisai cahaya dan letakkan di bawah pemeluwap mikroskop biasa untuk mendapatkan kesan medan gelap).
2. Pilih sumber cahaya yang kuat, biasanya dengan cahaya mikroskop untuk menghalang cahaya langsung daripada memasuki kanta objektif.
3. Tambah setitik minyak cedar antara pemeluwap dan slaid kaca untuk mengelakkan pantulan total cahaya yang menerangi pada pemeluwap, gagal mencapai objek yang akan diperiksa dan pencahayaan medan gelap.
4. Lakukan pelarasan pusat, iaitu, gerakkan pemeluwap secara mendatar supaya paksi optik pemeluwap dan paksi optik mikroskop berada pada garis lurus dengan ketat. Angkat dan turunkan kondenser, selaraskan titik fokus pemeluwap (puncak rasuk kon dalam Rajah 1-2) kepada objek yang akan diuji.
5. Pilih kanta objektif yang sepadan dengan pemeluwap, laraskan panjang fokus, dan kendalikan mengikut kaedah mikroskop biasa.
Steremikroskop
Mikroskop stereo, juga dikenali sebagai mikroskop pepejal atau cermin membedah, imej imej ruang tiga dimensi tegak, dan mempunyai ciri-ciri kesan stereoskopik yang kuat, pengimejan yang jelas dan lebar, jarak kerja yang panjang (biasanya 110mm) dan tontonan pembesaran berterusan. Selalunya digunakan dalam biologi untuk pemerhatian masa nyata semasa pembedahan
Sumber cahaya mikroskop optik biasa adalah cahaya selari, jadi ia membentuk imej satah dua dimensi; manakala mikroskop stereo menggunakan laluan optik dwi-saluran, dan rasuk kiri dan kanan dalam tiub teropong mempunyai sudut pandangan tertentu (biasanya 12o15o), jadi ia boleh Imej stereoskopik dalam ruang tiga dimensi terbentuk.
Mikroskop stereo digunakan dengan cara yang sama seperti mikroskop cahaya biasa, tetapi lebih mudah. Perbezaan utama antara keduanya ialah:
1. Objek pemeriksaan mikroskop stereo tidak perlu dijadikan slaid.
2. Peringkat mikroskop stereo dipasang terus pada pangkalan cermin, dan dilengkapi dengan panel dua sisi hitam dan putih atau panel kaca, dan pengendali boleh memilih mengikut objek dan keperluan pemeriksaan mikroskop.
3. Pengimejan mikroskop stereo adalah tegak, yang sesuai untuk operasi pembedahan.
4. Mikroskop stereo hanya mempunyai satu kanta objektif, dan pembesarannya boleh dilaraskan secara berterusan dengan memutar skru pelaras.
mikroskop pendarfluor
Mikroskopi pendarfluor ialah alat optik untuk penyelidikan kualitatif dan kuantitatif mengenai keamatan pendarfluor yang dipancarkan oleh bahan intrasel.
Terdapat dua jenis bahan pendarfluor dalam sel, seseorang boleh pendarfluor terus selepas disinari oleh sinar ultraungu, seperti klorofil, dsb.; bahan lain tidak mempunyai sifat ini, tetapi jika diwarnai dengan pewarna pendarfluor tertentu atau antibodi pendarfluor, ia boleh difluorehkan oleh sinar ultraungu. Boleh juga pendarfluor selepas penyinaran
Mikroskop Bioluminesensi Tegak/Mikroskop Bioluminesensi Terbalik
Prinsip mikroskop pendarfluor adalah menggunakan sumber cahaya titik dengan kecekapan bercahaya tinggi (seperti lampu merkuri tekanan ultra tinggi) untuk memancarkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu (seperti cahaya ultraviolet 3650λ atau cahaya ungu-biru 4200λ) melalui sistem penapis sebagai cahaya pengujaan untuk mengujakan bahan pendarfluor dalam spesimen. Selepas pendarfluor pelbagai warna dipancarkan, ia ditapis oleh penapis menyekat (atau menekan) di belakang kanta objektif, dan kemudian diperhatikan melalui pembesaran kanta mata.
Penapis penyekat mempunyai dua fungsi: satu adalah untuk menyerap dan menyekat cahaya pengujaan daripada memasuki kanta mata supaya tidak mengganggu pendarfluor dan merosakkan mata; yang lain ialah memilih dan membiarkan pendarfluor tertentu melalui, menunjukkan warna pendarfluor tertentu.
Mikroskop pendarfluor boleh dibahagikan kepada dua jenis mengikut prinsip laluan optik:
1. Mikroskopi Pendarfluor Penghantaran
Dalam mikroskop pendarfluor yang lebih lama, sumber cahaya pengujaan disalurkan melalui bahan spesimen melalui pemeluwap untuk mengujakan pendarfluor. Kelebihannya ialah pendarfluor kuat pada pembesaran rendah, tetapi kelemahannya ialah pendarfluor berkurangan dengan peningkatan pembesaran. Jadi ia hanya sesuai untuk memerhati bahan spesimen yang lebih besar.
2. Mikroskopi pendarfluor epi
Cahaya pengujaan jatuh dari kanta objektif ke permukaan spesimen, iaitu kanta objektif yang sama digunakan sebagai pemeluwap pencahayaan dan kanta objektif untuk mengumpul pendarfluor.
Pembahagi rasuk dichroic (cermin dichroic) perlu ditambah dalam laluan optik, yang membentuk sudut 45o dengan paksi optik. Cahaya pengujaan dipantulkan ke dalam kanta objektif dan dikumpulkan pada sampel. Cahaya pengujaan yang dipantulkan oleh permukaan slaid memasuki kanta objektif pada masa yang sama, kembali ke pembahagi rasuk dua warna, memisahkan cahaya pengujaan daripada pendarfluor, dan cahaya pengujaan yang tinggal diserap oleh penapis penyekat. Jika anda menukar kepada gabungan penapis pengujaan yang berbeza/pemecah rasuk dua warna/penapis menyekat, keperluan produk tindak balas pendarfluor yang berbeza boleh dipenuhi.
Kelebihan mikroskop pendarfluor jenis ini ialah pencahayaan bidang pandangan adalah seragam, pengimejan adalah jelas, dan semakin besar pembesaran, semakin kuat pendarfluor.
mikroskop kontras fasa
Mikroskop kontras fasa ialah mikroskop yang boleh menukar perbezaan fasa (atau perbezaan laluan optik) yang dihasilkan apabila cahaya melalui objek kepada perubahan amplitud (keamatan cahaya). Ia digunakan terutamanya untuk memerhati sel-sel hidup, bahagian tisu tidak ternoda atau spesimen bernoda yang tidak mempunyai kontras.
Mata manusia hanya boleh mengenal pasti perubahan dalam panjang gelombang (warna) dan amplitud cahaya yang boleh dilihat, tetapi bukan perubahan fasa. Walau bagaimanapun, kebanyakan spesimen biologi adalah sangat telus, dan amplitud gelombang cahaya pada asasnya tidak berubah selepas melaluinya, dan hanya perubahan fasa.
Mikroskop kontras fasa pada asasnya mengubah perbezaan laluan optik cahaya kelihatan yang melalui spesimen menjadi perbezaan amplitud, dengan itu meningkatkan kontras antara pelbagai struktur dan menjadikan pelbagai struktur kelihatan jelas. Cahaya dibiaskan selepas melalui spesimen, menyimpang dari laluan optik asal, dan ditangguhkan oleh 1/4λ (panjang gelombang) pada masa yang sama. Jika ia ditambah atau dikurangkan sebanyak 1/4λ, perbezaan laluan optik menjadi 1/2λ, dan kedua-dua rasuk mengganggu selepas paksi optik Kuatkan, tambah atau kurangkan amplitud, perbaiki kontras.
Secara struktur, mikroskop kontras fasa adalah berbeza daripada mikroskop optik biasa kerana:
1. Diafragma anulus mempunyai diafragma dengan bukaan cincin, yang dipasang di antara sumber cahaya dan pemeluwap. Fungsinya adalah untuk menjadikan cahaya yang melalui pemeluwap membentuk kon cahaya berongga dan fokus pada spesimen.
2. Plat fasa Mikroskop kontras fasa menambah plat fasa yang disalut dengan magnesium fluorida di dalam kanta objektif untuk melambatkan fasa cahaya langsung atau cahaya terbias sebanyak 1/4λ. Terdapat dua kawasan pada plat fasa, bahagian yang melaluinya cahaya langsung dipanggil "permukaan konjugat", dan bahagian yang melaluinya cahaya difraksi dipanggil "permukaan pampasan". Plat fasa dibahagikan kepada dua jenis mengikut kesan kerjanya:
(1) Plat fasa tambah: cahaya langsung ditangguhkan sebanyak 1/4λ, dan gelombang cahaya ditumpangkan selepas dua set gelombang cahaya bergabung untuk meningkatkan amplitud, dan struktur spesimen lebih cerah daripada medium sekeliling, membentuk kontras terang (atau kontras negatif).
(2) B tambah plat fasa: Cahaya terbias ditangguhkan sebanyak 1/4λ, dan gelombang cahaya kedua-dua kumpulan cahaya ditolak selepas paksi diselaraskan, dan amplitud menjadi lebih kecil. Struktur spesimen adalah lebih gelap daripada medium sekeliling, membentuk kontras gelap (atau kontras positif). Kanta objektif dengan plat fasa dipanggil kanta objektif kontras fasa, yang sering ditandakan dengan "Ph" pada perumahan kanta objektif.
