Perbezaan antara mikroskop pendarfluor dan laser confocal
mikroskop pendarfluor
1. Mikroskop pendarfluor ialah alat yang menggunakan cahaya ultraviolet sebagai sumber cahaya untuk menerangi objek yang diuji, menyebabkan ia mengeluarkan pendarfluor, dan kemudian memerhatikan bentuk dan kedudukan objek di bawah mikroskop. Mikroskopi pendarfluor digunakan untuk mengkaji penyerapan, pengangkutan, pengedaran, dan penyetempatan bahan dalam sel. Sesetengah bahan dalam sel, seperti klorofil, boleh mengeluarkan pendarfluor selepas terdedah kepada sinaran ultraungu; Sesetengah bahan sendiri mungkin tidak mengeluarkan pendarfluor, tetapi jika diwarnai dengan pewarna pendarfluor atau antibodi pendarfluor, ia juga boleh mengeluarkan pendarfluor di bawah sinaran ultraungu. Mikroskopi pendarfluor adalah salah satu alat untuk penyelidikan kualitatif dan kuantitatif mengenai bahan-bahan ini.
2. Prinsip mikroskop pendarfluor:
(A) Sumber cahaya: Sumber cahaya memancarkan cahaya pelbagai panjang gelombang (daripada ultraungu kepada inframerah).
(B) Sumber cahaya penapis pengujaan: Memancarkan cahaya dengan panjang gelombang tertentu yang boleh menghasilkan pendarfluor dalam spesimen, sambil menghalang cahaya yang tidak berguna untuk pendarfluor pengujaan.
(C) Spesimen pendarfluor: umumnya diwarnai dengan pigmen pendarfluor.
(D) Penapis menyekat: menghantar pendarfluor secara selektif dengan menyekat cahaya pengujaan yang belum diserap oleh spesimen, dan beberapa panjang gelombang juga dihantar secara selektif dalam pendarfluor. Mikroskop yang menggunakan cahaya ultraungu sebagai sumber cahaya untuk memancarkan pendarfluor daripada objek yang disinari. Mikroskop elektron pertama kali dipasang oleh Knorr dan Harroska di Berlin, Jerman pada tahun 1931. Mikroskop jenis ini menggunakan pancaran elektron berkelajuan tinggi dan bukannya pancaran cahaya. Disebabkan oleh panjang gelombang aliran elektron yang jauh lebih pendek berbanding dengan gelombang cahaya, pembesaran mikroskop elektron boleh mencapai 800000 kali, dengan had resolusi minimum 0.2 nanometer. Mikroskop elektron pengimbasan, yang mula digunakan pada tahun 1963, membolehkan orang ramai melihat struktur kecil pada permukaan objek.
3. Skop aplikasi: Digunakan untuk membesarkan imej objek kecil. Biasanya digunakan untuk pemerhatian biologi, perubatan, zarah mikroskopik, dll.
mikroskop confocal
1. Mikroskop confocal menambah kanta separa reflektif pada laluan cahaya yang dipantulkan, yang membengkokkan cahaya yang dipantulkan yang telah melalui kanta ke arah lain. Terdapat penyekat dengan lubang jarum pada titik fokusnya, dan lubang kecil terletak di titik fokus. Di belakang penyekat adalah tiub photomultiplier. Boleh dibayangkan bahawa cahaya yang dipantulkan sebelum dan selepas titik fokus cahaya pengesanan tidak dapat difokuskan pada lubang kecil melalui sistem confocal ini dan akan disekat oleh penyekat. Jadi fotometer mengukur keamatan cahaya yang dipantulkan pada titik fokus.
2. Prinsip: Mikroskop optik tradisional menggunakan sumber cahaya medan, dan imej setiap titik pada spesimen akan dipengaruhi oleh pembelauan atau cahaya bertaburan dari titik jiran; Mikroskop confocal pengimbasan laser menggunakan pancaran laser untuk membentuk sumber cahaya titik melalui lubang jarum yang diterangi untuk mengimbas setiap titik dalam satah fokus spesimen. Titik bercahaya pada spesimen diimej pada lubang jarum pengesanan, dan diterima titik demi titik atau garis oleh tiub photomultiplier (PMT) atau peranti gandingan termoelektrik (cCCD) selepas lubang jarum pengesanan, membentuk imej pendarfluor dengan cepat pada monitor komputer skrin. Lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pengesan disambungkan secara relatif kepada satah fokus kanta objektif. Titik pada satah fokus secara serentak difokuskan pada lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pelepasan, dan titik di luar satah fokus tidak akan diimej pada lubang jarum pengesanan. Ini menghasilkan imej confocal yang mewakili keratan rentas optik spesimen, mengatasi kelemahan imej kabur dalam mikroskop konvensional.
3. Bidang aplikasi: melibatkan perubatan, penyelidikan haiwan dan tumbuhan, biokimia, bakteriologi, biologi sel, tisu dan embrio, sains makanan, genetik, farmakologi, fisiologi, optik, patologi, botani, neurosains, biologi marin, sains bahan, sains elektronik, mekanik, geologi petroleum, dan mineralogi.
