Perbezaan antara mikroskop laser confocal dan mikroskop optik tradisional
Mikroskopi Pendarfluor Konfokal Pengimbasan Laser ialah instrumen analisis biologi molekul dan sel yang agak maju yang menggunakan komputer, laser dan teknologi pemprosesan imej untuk mendapatkan data tiga dimensi sampel biologi. Ia digunakan terutamanya untuk memerhati struktur sel hidup dan perubahan biologi molekul dan ion tertentu, analisis kuantitatif, dan penentuan kuantitatif masa nyata.
Prinsip mikroskopi laser confocal: gunakan lubang jarum pencahayaan yang diletakkan di belakang sumber cahaya dan lubang jarum pengesanan diletakkan di hadapan pengesan untuk merealisasikan pencahayaan titik dan pengesanan titik. Cahaya yang dipancarkan daripada sumber cahaya melalui lubang jarum pencahayaan difokuskan pada satu titik pada satah fokus sampel, dan pendarfluor yang dipancarkan dari titik ini diimej pada lubang jarum pengesanan, dan sebarang cahaya yang dipancarkan di luar titik ini disekat oleh pengesanan. lubang jarum. Lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pengesanan adalah konjugat ke titik penyinaran atau titik yang dikesan, jadi titik yang dikesan ialah titik confocal, dan satah di mana titik yang dikesan terletak adalah satah confocal.
Komputer memaparkan titik yang dikesan pada skrin komputer dalam bentuk titik imej. Untuk menjana imej yang lengkap, sistem pengimbasan dalam laluan optik mengimbas pada satah fokus sampel untuk menghasilkan imej confocal yang lengkap. Selagi pentas bergerak ke atas dan ke bawah sepanjang paksi Z, lapisan baharu sampel dipindahkan ke satah confocal, dan lapisan baharu sampel diimej pada monitor. Dengan pergerakan berterusan paksi Z, imej berterusan lapisan sampel yang berbeza boleh diperolehi. Imej potongan cahaya.
Perbezaan Antara Mikroskop Cahaya Tradisional
Mikroskop pendarfluor tradisional mempunyai kelemahan yang tidak dapat diatasi: struktur pendarfluor di luar satah fokus adalah kabur dan kabur. Sebabnya ialah kebanyakan spesimen biologi mempunyai struktur yang bertindih. Jika struktur berlabel pendarfluor diedarkan pada tahap yang berbeza dan bertindih, pendarfluor bertaburan dari atas atau bawah satah fokus juga diterima oleh kanta objektif, dan resolusi mikroskop pendarfluor akan bertambah baik. kurangkan.
Berdasarkan mikroskop optik tradisional, mikroskop confocal pengimbasan laser menggunakan cahaya laser sebagai sumber cahaya, mengguna pakai prinsip dan peranti pemfokusan konjugat, dan menggunakan komputer untuk melakukan pemprosesan imej digital, pemerhatian, analisis dan output objek yang diperhatikan. Sampel boleh diimbas secara tomografi dan digambarkan untuk pemerhatian dan analisis yang tidak merosakkan struktur ruang tiga dimensi sel. Pada masa yang sama, menggunakan pelabelan imunofluoresen dan probe pelabelan pendarfluor ion, teknologi ini bukan sahaja dapat memerhati sel tetap dan bahagian tisu, tetapi juga melakukan pemerhatian dinamik masa nyata dan pengesanan struktur, molekul, ion dan aktiviti hidup sel hidup, di peringkat subselular Memerhati isyarat fisiologi seperti Ca2 tambah, nilai pH, potensi membran dan perubahan dalam morfologi sel, telah menjadi generasi baharu alat penyelidikan yang berkuasa dalam bidang morfologi, biologi sel molekul, neurosains, farmakologi dan genetik.
