Hubungan antara jumlah pembesaran dan resolusi mikroskop minyak mikrobiologi
Biasanya terdapat tiga jenis kanta objektif untuk mikroskop yang digunakan dalam penyelidikan mikrobiologi: kanta objektif pembesaran rendah minyak (10 ×), kanta objektif pembesaran tinggi (40 ×), dan kanta minyak ( 100×). Terdapat juga perkataan "OI" (rendaman minyak) yang menunjukkan bahawa ia mempunyai pembesaran terbesar antara ketiga-tiganya. Bergantung pada penggunaan kanta mata dengan pembesaran berbeza, objek yang diperiksa boleh dibesarkan 1000-1600 kali. Apabila digunakan, perbezaan antara kanta minyak dan kanta objektif lain ialah tiada lapisan udara antara slaid dan kanta objektif, tetapi lapisan minyak, yang dipanggil sistem rendaman minyak. Minyak cedar sering digunakan sebagai minyak ini kerana indeks biasan minyak cedar ialah n=1.52, iaitu sama seperti kaca. Apabila cahaya melalui slaid kaca, ia boleh memasuki kanta objektif terus melalui minyak cedar tanpa pembiasan. Jika medium antara slaid kaca dan kanta objektif ialah udara, ia dipanggil sistem kering. Apabila cahaya melalui slaid kaca, ia dibiaskan dan bertaburan, dan cahaya yang memasuki kanta objektif jelas berkurangan, yang mengurangkan pencahayaan bidang pandangan. Penggunaan kanta minyak bukan sahaja dapat meningkatkan pencahayaan, tetapi juga meningkatkan apertur berangka, kerana kecekapan pembesaran mikroskop ditentukan oleh apertur berangkanya. Apertur berangka yang dipanggil ialah hasil darab separuh sinus sudut maksimum di mana cahaya dipancarkan ke kanta objektif (dipanggil sudut kanta) didarab dengan indeks biasan medium antara plat kaca dan kanta objektif. Ia boleh dinyatakan dengan formula berikut: NA=n×sinа dengan NA{{10}} Bukaan berangka; n=indeks biasan medium;=separuh daripada sudut tuju maksimum, iaitu separuh daripada sudut mulut cermin. Oleh itu, lebih besar sudut di mana cahaya menyerang objektif, lebih besar kecekapan mikroskop. Saiz sudut ini ditentukan oleh diameter dan panjang fokus objektif. Pada masa yang sama, had teori a ialah 90. . dosa90. =1, jadi apabila udara digunakan sebagai medium (n=1), apertur berangka tidak boleh melebihi 1. Contohnya, apabila minyak cedar digunakan sebagai medium, n meningkat dan apertur berangka juga bertambah. Contohnya, jika sudut tuju cahaya ialah 120o, dan separuh sinusnya ialah sin60o=0.87, maka: apabila udara digunakan sebagai medium: NA{ {22}}×0.87=0.87 Apabila air digunakan sebagai medium: NA=1.33×0.87=1.15 Apabila minyak cedar digunakan sebagai medium : NA =1.52×0.87=1.32 Peleraian mikroskop merujuk kepada keupayaan mikroskop untuk membezakan jarak minimum antara dua titik. Ia berkadar terus dengan apertur berangka kanta objektif dan berkadar songsang dengan panjang gelombang. Oleh itu, lebih besar apertur berangka kanta objektif dan lebih pendek panjang gelombang gelombang cahaya, lebih besar resolusi mikroskop dan lebih jelas struktur halus objek yang diperiksa dapat dibezakan. Oleh itu, resolusi tinggi bermakna jarak boleh diselesaikan yang kecil. Kedua-dua faktor ini berkait songsang. Biasanya sesetengah orang bercakap tentang resolusi sebagai mikrometer atau nanometer. Ini sebenarnya mengelirukan resolusi dengan jarak resolusi minimum. bangun. Kuasa penyelesaian mikroskop dinyatakan dengan jarak minimum yang boleh diselesaikan. Jarak minimum yang boleh dibezakan antara dua titik=λ/2NA di mana λ=panjang gelombang gelombang cahaya. Purata panjang gelombang cahaya yang dapat dirasakan oleh mata kasar kita ialah 0.55 μm. Jika kanta objektif berkuasa tinggi dengan apertur berangka 0.65 digunakan, ia boleh membezakan jarak antara dua titik. ialah 0.42μm. Jarak antara dua titik di bawah 0.42 μm tidak dapat dibezakan. Walaupun kanta mata yang lebih besar digunakan untuk meningkatkan jumlah pembesaran mikroskop, ia masih tidak dapat dibezakan. Satu-satunya penyelesaian ialah menggunakan kanta objektif yang lebih besar dengan apertur berangka yang lebih besar untuk meningkatkan resolusinya. Contohnya, apabila menggunakan kanta minyak dengan apertur berangka 1.25, jarak minimum antara dua titik yang boleh dibezakan=0.55/(2×1.25)=0.22μm. Oleh itu, kita dapat melihat bahawa jika kanta objektif berkuasa tinggi (NA=0.65) dengan pembesaran 40 kali dan kanta mata dengan pembesaran 24 kali digunakan, walaupun jumlah pembesaran ialah 960 kali, jarak minimum resolusi hanya 0.42 μm. Jika anda menggunakan kanta minyak dengan pembesaran 90 kali (NA=1.25) dan kanta mata dengan pembesaran 9 kali, walaupun jumlah pembesaran ialah 810 kali, anda boleh menyelesaikan jarak 0.22 μm.
