Apakah kelebihan mikroskop laser confocal
Berbanding dengan mikroskop medan lebar tradisional, mikroskopi confocal pengimbasan laser mempunyai ciri definisi tinggi, resolusi tinggi, dan kepekaan tinggi. Ia digunakan secara meluas dalam bidang bioperubatan dan telah menjadi alat pengimejan yang penting dalam bidang ini. Mengapa confocal boleh mendapat begitu banyak cinta, dan apakah kelebihannya? Artikel ini menyenaraikan tiga aspek untuk membincangkan kelebihan confocal.
Hanya kumpulkan isyarat pada satah fokus, menjadikan imej jelas daripada kabur
Jadi bagaimana mikroskop confocal mencapai kelebihan ini? Ini disebabkan oleh perkakasan confocal utama—lubang jarum, seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 2. Ia adalah lubang kecil di hadapan pengesan dan diletakkan pada konjugat satah optik ke satah fokus sampel. Apabila cahaya pengujaan menyinari sampel, kedua-dua satah fokus dan satah bukan fokus kawasan sampel akan teruja untuk menghasilkan isyarat pendarfluor, laraskan saiz lubang jarum yang sesuai (biasanya 1 Au), supaya isyarat pendarfluor pada satah fokus (garisan putus-putus hijau) boleh menjadi isyarat Pendarfluor (garis putus-putus merah dan biru) yang melalui lubang jarum untuk mencapai pengesan keluar dari satah fokus tidak boleh mencapai pengesan melalui lubang jarum. Melalui penambahan lubang jarum perkakasan, confocal boleh mendapatkan imej yang jelas dan berkualiti tinggi tanpa mengubah kaedah membuat mikroskop pendarfluor biasa.
Disebabkan kewujudan lubang jarum, kita hanya boleh memperoleh isyarat pada satah fokus dan mendapatkan imej dua dimensi resolusi tinggi. Dengan melaraskan kedudukan paksi Z secara berterusan, imej dua dimensi pada kedudukan paksi Z yang berbeza boleh diperoleh, dan satu siri imej "hirisan optik" berterusan boleh diperolehi. Selepas mendapatkan kepingan optik ini, modul 3D yang dilengkapi dengan perisian instrumen boleh digunakan untuk membina semula imej 3D untuk membina imej 3D yang jelas. Koleksi imej kepingan optik yang tidak merosakkan dan berterusan ini merealisasikan fungsi "CT sel".
Ketepatan hasil pengkolokalisasian berkait rapat dengan peleraian imej, jadi kita perlu memilih kaedah pengimejan peleraian yang lebih tinggi apabila melakukan eksperimen pengkolokalisasian. Berbanding dengan mikroskop tradisional, mikroskop confocal telah menjadi alat yang berkuasa untuk penyelidikan kolokalisasi kerana kelebihan resolusi tingginya.
Oleh kerana kewujudan had pembelauan, resolusi optik confocal konvensional adalah sekitar 200nm. Apabila kita perlu memerhati struktur yang lebih besar daripada 200nm, confocal boleh menentukan dengan tepat tahap kolokalisasi. Jika analisis kolokalisasi diperlukan, modul analisis kolokalisasi yang dilengkapi dalam perisian confocal boleh dipilih.
