Apakah itu Mikroskopi Pendarfluor Dua Foto
Prinsip asas pengujaan dua foton ialah: dalam kes ketumpatan foton yang tinggi, molekul pendarfluor boleh menyerap dua foton panjang gelombang panjang pada masa yang sama, dan memancarkan foton panjang gelombang yang lebih pendek selepas tempoh singkat yang dipanggil seumur hidup keadaan teruja. . ; kesannya adalah sama seperti menggunakan foton yang panjang gelombangnya separuh daripada panjang gelombang panjang untuk mengujakan molekul pendarfluor. Pengujaan dua foton memerlukan ketumpatan foton yang tinggi. Untuk tidak merosakkan sel, mikroskop dua foton menggunakan laser berdenyut terkunci mod tenaga tinggi. Laser yang dipancarkan oleh laser ini mempunyai tenaga puncak yang tinggi dan tenaga purata yang rendah, lebar nadinya hanya 100 femtosaat, dan frekuensinya boleh mencapai 80 hingga 100 megahertz. Apabila menggunakan kanta objektif apertur berangka tinggi untuk memfokuskan foton laser berdenyut, ketumpatan foton pada titik fokus kanta objektif adalah yang tertinggi, dan pengujaan dua foton hanya berlaku pada titik fokus kanta objektif, jadi mikroskop dua foton tidak memerlukan lubang jarum confocal, yang meningkatkan kecekapan pengesanan Pendarfluor.
Dalam fenomena pendarfluor am, disebabkan oleh ketumpatan foton cahaya pengujaan yang rendah, molekul pendarfluor hanya boleh menyerap satu foton pada masa yang sama, dan kemudian memancarkan foton pendarfluor melalui peralihan sinaran, iaitu pendarfluor foton tunggal. Untuk proses pengujaan pendarfluor menggunakan laser sebagai sumber cahaya, pendarfluor dua foton atau berbilang foton mungkin berlaku. Pada masa ini, keamatan sumber cahaya pengujaan yang digunakan adalah tinggi, dan ketumpatan foton memenuhi keperluan molekul pendarfluor yang menyerap dua foton pada masa yang sama. Dalam proses menggunakan laser am sebagai sumber cahaya pengujaan, ketumpatan foton masih tidak mencukupi untuk menghasilkan fenomena penyerapan dua foton. Biasanya, laser berdenyut femtosaat digunakan, dan kuasa serta-mertanya boleh mencapai susunan megawatt. Oleh itu, panjang gelombang pendarfluor dua foton adalah lebih pendek daripada panjang gelombang cahaya pengujaan, yang bersamaan dengan kesan yang dihasilkan oleh pengujaan pada separuh panjang gelombang pengujaan.
