Apakah spesifikasi sampel yang diperlukan untuk mikroskop cahaya?
Dalam proses penyediaan sampel mikroskop optik, ketebalan kepingan sampel adalah antara 2-25um; ketebalan hirisan mikroskop elektron adalah dalam 50-100nm (kecuali mikroskop elektron voltan tinggi, yang ketebalan sampelnya boleh mencapai 1um), jadi kaedah hirisan yang digunakan tidak semuanya sama.
Dari segi pembawa, pembawa bahagian mikroskop optik adalah slaid kaca, manakala pembawa bahagian mikroskop elektron adalah grid.
Dari segi penetapan, hirisan mikroskop optik difikatkan dengan fiksatif kompaun, manakala hirisan mikroskop elektron difikatkan berulang kali dengan fiksatif tunggal.
Dari segi pewarnaan, pewarnaan sampel optik adalah agak mudah. Mengikut sampel pemerhatian yang berbeza dan jenis mikroskop optik, ia biasanya cukup untuk mengotorkan dengan beberapa agen pewarnaan tetap. Terdapat banyak kaedah yang rumit untuk mengotorkan semula sampel mikroskop elektron, seperti pewarnaan negatif, pewarnaan perak dan sebagainya.
Dari segi embedding, parafin, collodion, gelatin, dsb. digunakan sebagai agen embedding untuk bahagian mikroskop optik; resin epoksi, resin polistirena, resin isobutilena, dan resin larut air digunakan sebagai agen pemasukan untuk bahagian mikroskop elektron.
Untuk memastikan bahawa medan pandangan mikroskop dapat diterangi sama rata dan sepenuhnya, sistem optik pencahayaan mesti dilaraskan apabila mikroskop pertama kali dipasang dan dinyahpepijat. Ini adalah cara penting dan cara paling asas untuk menggunakan mikroskop dengan betul dan mendapatkan hasil yang betul dan boleh dipercayai. keperluan. Di samping itu, menguasai pelarasan sistem laluan optik pencahayaan dengan betul adalah langkah yang perlu selepas menggantikan mentol sumber cahaya semasa penggunaan mikroskop, dan ia juga merupakan cara yang diperlukan untuk memeriksa prestasi mikroskop dari semasa ke semasa semasa harian. guna. Pelarasan sistem laluan optik pencahayaan mikroskop terutamanya merangkumi empat perkara berikut: 1. Pelarasan awal ruang lampu sumber cahaya di luar mikroskop ① Buka cangkang ruang lampu dahulu, tekan klip spring untuk meletakkan mentol halogen ke dalam soket, dan elakkan sentuhan terus dengan mentol dengan jari anda semasa pemasangan (boleh dipisahkan dengan kain lembut atau kertas) untuk mengelakkan Terdapat cap jari dan kotoran lain pada mentol, yang akan menjejaskan hayat perkhidmatan mentol. ②Letakkan rumah lampu di atas meja, selepas menghidupkan kuasa, gunakan pemutar skru khas untuk melaraskan lubang tombol fokus lampu (ditandakan dengan "←→"), supaya filamen ditayangkan pada dinding 1-2 m jauhnya, dan imej filamen dilaraskan. Kemudian laraskan ketinggian lampu dan laraskan lubang benang (ditandakan dengan "──") untuk menjadikan kedudukan filamen sesuai; kemudian laraskan kedudukan kiri dan kanan lampu untuk melaraskan lubang skru (ditandakan dengan "──") untuk menjadikan kedudukan kiri dan kanan filamen sesuai .
2. Tujuan memeriksa dan membetulkan kedudukan penerang sumber cahaya (filamen) dalam mikroskop adalah untuk melaraskan hujung imej penerang tepat ke dalam medan pandangan kanta objektif, dan untuk memastikan bahawa medan pandangan mikroskop diterangi sepenuhnya dan seragam dari perspektif sumber cahaya. Pencahayaan, yang merupakan prasyarat untuk melaraskan sistem pencahayaan Kuhler. Alat asas yang diperlukan: Teleskop pemusatan dilengkapi apabila mikroskop dibeli. ① Cabut palam lengan kaca beku di rumah lampu, dan letakkan rumah lampu semula pada mikroskop. ② Pilih kanta objektif 10×, hidupkan program sumber cahaya untuk mencari sampel dan fokuskannya dengan jelas, kemudian gunakan kanta objektif 40× untuk memfokuskan sampel dengan jelas (40× kanta objektif Anda boleh melihat keseluruhan gambar filamen ); ③ Buka diafragma apertur dan diafragma medan pemeluwap secara maksimum; ④ Cabut salah satu kanta mata, gantikan dengan teleskop berpusat, genggam bahagian putih, regangkan kanta mata hitam dengan tangan yang lain, Anda boleh melihat imej filamen dalam bidang penglihatan; ⑤ Jika kedudukan filamen tidak sesuai, laraskan lubang "──" untuk melaraskan imej filamen dalam arah mendatar, dan laraskan lubang "──" untuk melaraskan imej filamen dalam arah menegak sehingga Laraskan imej filamen kepada imej bulat cahaya yang hanya mengisi apertur kanta objektif; ⑥ Selepas pelarasan, masukkan lengan kaca beku kembali ke kedudukan asal, cabut plag teleskop tengah, dan gantikan kanta mata untuk pelarasan seterusnya. Pelarasan ruang lampu sumber cahaya pencahayaan yang disebutkan di atas di luar mikroskop dan pengesahan kedudukan badan bercahaya sumber cahaya di dalam mikroskop hanya perlu dilakukan apabila mikroskop pertama kali dipasang dan dinyahpepijat dan apabila mentol diganti , dan mikroskop tidak boleh dilaraskan secara rawak apabila menggunakan mikroskop. Sekiranya berlaku kekeliruan, ia boleh dilaraskan kembali kepada keadaan asal mengikut langkah di atas.
3. Pelarasan yang betul bagi sistem pencahayaan Kohler Salah satu tugas utama pelarasan mikroskop yang betul ialah pelarasan sistem laluan optik pencahayaan, dan kuncinya ialah pelarasan sistem pencahayaan Kohler. Bagi setiap orang yang menggunakan mikroskop, terutamanya mereka yang melakukan fotomikrograf, mereka harus mempunyai pemahaman dan penguasaan tertentu tentang prinsip sistem pencahayaan Kuhler dan langkah-langkah pelarasannya untuk memberikan permainan sepenuhnya kepada fungsi mikroskop dan mengambil gambar. Foto yang keluar boleh menjadi lebih konsisten dan sempurna kesannya. Prinsip sistem pencahayaan Kohler adalah semata-mata: cahaya yang dipancarkan oleh mana-mana titik pada penerang sumber cahaya boleh menerangi medan pandangan mikroskop, dan cahaya yang dipancarkan oleh setiap titik pada penerang sumber cahaya dikumpulkan, dan di lapangan. pandangan mikroskop Pencahayaan yang sangat penuh dan seragam dicapai. Tujuan melaraskan sistem pencahayaan Kuhler adalah untuk mendapatkan pencahayaan yang seragam dan mencukupi untuk medan pandangan yang diperhatikan, dan untuk mengelakkan cahaya sesat daripada menjejaskan atau mengganggu sistem pengimejan, untuk mengelakkan pengabusan pada filem semasa fotografi. Komponen yang diperlukan untuk sistem pencahayaan Kohler pelarasan tinggi: diafragma medan, sistem kanta pemeluwap yang boleh dilaraskan pada paksi. ① Pilih 10× kanta objektif dan 10× kanta mata ② Letakkan kanta hadapan pemeluwap ke dalam laluan optik, laraskan diafragma apertur ke kedudukan sederhana (tidak terlalu besar atau kecil), kemudian naikkan pemeluwap ke kedudukan atas, dan laraskan meja putar pemeluwap kepada kedudukan "J" medan terang ③ Laraskan diafragma medan kepada minimum (0.1)
④ Letakkan sampel biologi yang dimeterai di atas pentas, hidupkan sumber cahaya, dan fokus dengan jelas
⑤ Akan terdapat kawasan yang separa bercahaya atau titik terang dalam bidang pandangan, iaitu imej kabur diafragma medan, di mana butiran sampel dapat dilihat dengan jelas; di luarnya adalah medan pandangan yang lebih gelap, yang mungkin tidak semestinya Lihat butiran sampel dengan jelas
⑥Sesuaikan sedikit pemeluwap ke bawah, supaya titik terang dalam bidang pandangan secara beransur-ansur mengecut, dan secara beransur-ansur menjadi imej poligon yang jelas, iaitu imej jelas diafragma medan;
⑦Secara amnya, imej poligon tidak berada di tengah-tengah medan pandangan, dan perlu melaraskan sepasang skru pemusat pemeluwap untuk melaraskan imej poligon diafragma medan ke kedudukan tengah;
⑧Buka diafragma medan pandangan secara beransur-ansur untuk menjadikan imej poligon sebagai poligon bertulis medan pandangan, dan semak status penjajaran. Jika penjajaran tidak sesuai, teruskan menala halus skru penjajaran;
⑨Buka sedikit diafragma medan pandangan, supaya imej poligonnya hilang begitu sahaja di tepi medan pandangan. Setakat ini, pelarasan sistem pencahayaan Kohler selesai. Selepas sistem pencahayaan Kohler dilaraskan, seluruh bidang pandangan diterangi sama rata, dan mikrograf yang diambil adalah terang dan jelas dengan kontras biasa.