Apakah teknik yang boleh digunakan untuk meningkatkan resolusi mikroskop?
Salah satu alat ujian utama ialah mikroskop, dan resolusi ialah metrik penting untuk menilai prestasi alat. Resolusi ialah keupayaan untuk membezakan antara dua garis atau titik kecil dengan jelas pada jarak dekat. Mata itu sendiri berfungsi sebagai mikroskop. Resolusi mata manusia pada jarak penglihatan, yang diterima secara universal sebagai 25 cm, adalah sekitar 1/10mm dalam keadaan pencahayaan biasa. Kerana garis lurus boleh merangsang beberapa sel saraf, resolusi mata boleh ditingkatkan semasa menonton dua garis lurus.
Oleh kerana resolusi mata manusia hanya 1/10mm, ia tidak dapat membezakan antara dua objek yang sangat kecil yang jaraknya lebih dekat daripada 1/10mm. Jadi pembangunan mikroskop optik untuk pemeriksaan mikroskopik didahulukan, diikuti oleh pembangunan mikroskop elektron. Jarak terpendek antara dua bintik kecil yang boleh dibezakan dengan jelas pada spesimen dirujuk sebagai resolusi mikroskop. D=0.61/NA ialah formula pengiraannya.
Dalam formula: D ialah resolusi (um); λ ialah panjang gelombang sumber cahaya (um); NA ialah apertur berangka bagi kanta objektif (juga dipanggil nisbah apertur).
Ia boleh didapati daripada formula bahawa resolusi mikroskop bergantung pada panjang gelombang sumber cahaya kejadian dan apertur berangka bagi kanta objektif yang dipadankan. Ia boleh dilihat bahawa kaedah memperbaiki mikroskop optik:
1. Kurangkan panjang gelombang sumber cahaya.
Panjang gelombang cahaya nampak yang lebih pendek ialah 390nm. Jika cahaya ultraviolet dengan panjang gelombang ini digunakan sebagai sumber pencahayaan, resolusi mikroskop optik boleh dikurangkan kepada 0.2um. Walau bagaimanapun, oleh kerana kaca bahan yang paling biasa menyerap sejumlah besar cahaya dengan panjang gelombang di bawah 340nm, cahaya ultraungu tidak boleh membentuk imej yang jelas dan terang selepas sejumlah besar pengecilan. Oleh itu, bahan mahal seperti kuarza (yang boleh melalui cahaya ultraviolet serendah 200nm) dan fluorit (yang boleh melalui cahaya ultraviolet serendah 185nm) perlu digunakan, dan mikroskop cahaya ultraungu tidak boleh diperhatikan dengan mata kasar , dan juga sampel yang diperhatikan Oleh kerana batasan mikroskop, ditambah dengan kos yang tinggi, kaedah meningkatkan resolusi mikroskop ini tidak digunakan secara meluas kerana batasannya sendiri.
2. Tingkatkan apertur berangka NA bagi kanta objektif.
Bukaan berangka NA=n*sin(u)
Dalam formula, n ialah indeks biasan medium antara kanta objektif dan spesimen; u ialah separuh sudut bukaan bagi kanta objektif. Oleh itu, dari perspektif reka bentuk optik, dengan sewajarnya menggunakan sudut apertur yang lebih besar atau meningkatkan indeks biasan telah menjadi kaedah biasa untuk meningkatkan resolusi mikroskop optik. Secara amnya, medium kanta objektif pembesaran rendah seperti di bawah 10X ialah udara, dan indeks biasannya ialah 1, iaitu kanta objektif kering; medium rendaman air ialah air suling, dan indeks biasannya ialah 1.33; medium kanta objektif rendaman minyak ialah minyak cedar atau minyak lutsinar lain, indeks biasannya adalah purata Sekitar 1.52, hampir dengan indeks biasan kanta dan slaid kaca, seperti kanta minyak 100X Olympus. Kanta objektif rendaman air dan kanta objektif rendaman minyak bukan sahaja mempunyai pembesaran tinggi tetapi juga meningkatkan resolusi kanta objektif kerana penggunaan media indeks biasan yang tinggi.
