Mengapakah pembesaran kanta minyak lebih besar daripada pembesaran kanta objektif biasa?
Sebab mengapa bakteria perlu diperbaiki sebelum mengotorkan dalam eksperimen mikrobiologi:
1: Membunuh sel, mudah dinodai dengan pewarna.
2: Buat bakteria melekat pada slaid kaca, dan ia tidak mudah dihanyutkan oleh air.
Apabila membetulkan, ia perlu dikeringkan dengan perlahan. Jika anda benar-benar ingin mempercepatkan, anda boleh mengeringkannya beberapa kali pada jarak di atas nyalaan lampu alkohol. Jangan biarkan gelongsor kaca menjadi panas, jika tidak, ia boleh memusnahkan bentuk hidupan bakteria.
Pewarnaan gram dan pemerhatian mikroskopik bakteria
1. Prinsip eksperimen
Prinsip pewarnaan Gram: Bakteria bertindak balas secara berbeza terhadap pewarnaan Gram disebabkan oleh komposisi dan struktur dinding selnya. Dinding sel bakteria Gram-positif adalah terutamanya simpulan rangkaian yang dibentuk oleh peptidoglycan. Apabila dirawat dengan etanol, saiz liang struktur rangkaian menjadi lebih kecil kerana dehidrasi, dan kebolehtelapan berkurangan, supaya kompleks kristal violet-iodin Bahan tidak mudah dicairkan dan dikekalkan dalam sel, dan biru- warna ungu agen pewarna utama masih dikekalkan selepas penyahwarnaan dan pewarnaan balas. Lapisan peptidoglycan dinding sel bakteria Gram-negatif adalah nipis dan kandungan lipid adalah tinggi, jadi apabila rawatan penyahwarnaan dilakukan, lipid dibubarkan oleh etanol (atau aseton), dan kebolehtelapan dinding sel meningkat, jadi bahawa kompleks violet-iodin kristal Ia lebih mudah untuk dicairkan, dan selepas pewarnaan balas dengan pewarna balas, sel-sel diwarnakan dengan warna merah pewarna balas. Prinsip pengimejan mikroskop: Mikroskop optik biasa moden menggunakan dua sistem kanta kanta mata dan kanta objektif untuk membesarkan imej, jadi ia sering dipanggil mikroskop majmuk. Dalam sistem optik mikroskop, prestasi kanta objektif adalah yang paling kritikal, dan pembesaran kanta minyak adalah yang terbesar, yang paling penting untuk penyelidikan mikrobiologi. Tujuan utama menambah minyak rendaman antara slaid kaca dan kanta adalah untuk meningkatkan kecerahan pencahayaan dan meningkatkan resolusi mikroskop. Minyak digunakan sebagai ganti udara sebagai medium penghantaran cahaya untuk mengurangkan pembiasan atau pantulan total cahaya dan menjadikan imej yang diperhatikan lebih jelas.
2. Peralatan eksperimen
1. Tanah jajahan:
Escherichia coli 24 jam kultur slant agar nutrient,
Staphylococcus aureus kira-kira 24j nutrien agar kultur senget, Bacillus subtilis 12-18h nutrien agar kultur senget.
2. Penyelesaian atau reagen:
Air suling, larutan iodin, larutan pewarna kristal ungu, alkohol 95 peratus, larutan pewarna safranin, minyak cedar. 3. Instrumen:
Mikroskop, slaid kaca, gelung inokulasi, lampu alkohol, pinset, tisu kanta.
3. Langkah eksperimen
a:
1. Calit
Keluarkan slaid, nyalakan slaid, bakar alkohol pada slaid dan sterilkan, letakkan setitik kecil air suling di tengah, gunakan gelung inokulasi untuk memilih sedikit bakteria pada medium ujian secara perlahan. tiub, Semasa keseluruhan proses, mulut tabung uji harus berada di atas lampu alkohol, dan kelajuannya harus cepat untuk mencegah pencemaran medium kultur. Kemudian sapukan titisan air kecil pada slaid kaca secara membulat, hentikan apabila titisan air keruh, dan tunggu sehingga kering dan betul.
2. pencelupan primer
Titiskan kristal violet (sesuai untuk hanya menutup filem bakteria) pada koloni, pewarna selama 1-2 minit, tuangkan larutan pewarna dan bilas dengan air halus dari bahagian atas slaid sehingga eluat tidak berwarna, dan letakkan noda pada slaid. Goncangkan air pada kepingan.
3. Mordant
Tambah larutan iodin secara titisan untuk membasuh sisa air, tutup selama kira-kira 1 minit, dan basuh dengan air.
4. Penyahwarnaan
Goncangkan air pada slaid kaca, condongkan slaid kaca, dan tambahkan alkohol 95 peratus untuk menyahwarnakannya di bawah latar belakang putih, sehingga alkohol yang keluar tidak kelihatan biru, segera bilas alkohol dengan air, dan letakkan slaid kaca Goncang keluarkan air pada kepingan.
5. Counterstaining
Calit balas dengan larutan safranin selama kira-kira 1-2 minit, basuh dengan air, dan kemudian keringkan dengan kertas penyerap
6. Pemeriksaan mikroskopik:
Cari koloni bakteria untuk diperhatikan di bawah kanta pembesaran rendah (terus gerakkan slaid, jika anda merasakan bayang merah, berhenti segera, laraskan pembesaran, jika ia bukan koloni, teruskan mencari), naikkan tong kanta, dan kemudian beralih ke cermin minyak. Tambah setitik minyak cedar ke kawasan sampel, dan berhati-hati menurunkan tong kanta dengan pelaras kasar supaya kanta minyak tenggelam dalam minyak dan hampir menyentuh spesimen. Naikkan pemeluwap ke kedudukan tertinggi dan buka apertur sepenuhnya, gunakan pelaras kasar untuk menaikkan laras kanta perlahan-lahan sehingga imej objek muncul dalam medan pandangan dan gunakan pelaras halus untuk menjadikannya jelas dan fokus.
