Mikroskop biologi pada isipadu blok tisu
Mikroskop biologi dengan pemeluwap boleh menggerakkan pemeluwap ke atas dan ke bawah untuk menjadikan kecerahannya sederhana, dan juga boleh menukar apertur penganalisis cahaya berubah untuk mencapai kecerahan sederhana 9b. Jika cahaya berada di bawah matahari, pemeluwap boleh dinaikkan dengan sewajarnya, dan apertur hingar optik berubah-ubah boleh dibesarkan dengan sewajarnya. Jika cahaya terlalu kuat, pemeluwap boleh diturunkan dengan sewajarnya, dan apertur persimpangan boleh dikurangkan dengan sewajarnya. Jika anda masih berasa mempesonakan dalam kes ini, anda boleh memilih penapis yang sesuai dan meletakkannya pada pendakap di bawah pemeluwap. Tussah ini boleh mendapat kecerahan yang memuaskan hati anda. Sudah tentu, adalah perlu untuk mendapatkan pengalaman selepas tempoh latihan tertentu dalam melaraskan kedudukan atas dan bawah pemeluwap untuk menukar saiz apertur bacaan optik dan memilih penapis yang sesuai.
Masalah biomikroskop yang sangat penting ialah kandungan 65 elemen dalam setiap bahagian selepas pengeringan beku dan pemasukan resin (FD) dan pengeringan beku mesti dikendalikan dengan teliti, supaya tidak merosakkan sel yang akan diperhatikan dan dianalisis. Oleh kerana analisis mikro X-ray bukan sahaja melibatkan banyak langkah, tetapi juga memerlukan kos yang tinggi, amat dikesali untuk membuat kesimpulan yang salah jika sel yang dianalisis adalah sel yang rosak atau sel mati selepas rawatan jangka panjang dan pelbagai langkah. Sebagai contoh, sel miokardium yang dipisahkan oleh rawatan kolagenase mempunyai dua bentuk, satu batang panjang dan satu lagi bulat. Yang terakhir adalah sel yang mati yang rosak semasa pemisahan sel.
Kandungan dan pengedaran elektrolit dalam kedua-dua jenis sel ini sangat berbeza di bawah mikroskop biologi. Na adalah sangat tinggi dan K sangat rendah dalam sel miokardium bulat, dan kepekatan ca dalam dendrit linear adalah sangat tinggi. Berbanding dengan kaedah analisis yang lain, terbukti bahawa Na dan K rendah dalam sel bulat dan ca tinggi dalam mitokondria adalah hasil kerosakan membran sel semasa pemisahan sel. Kaedah penetapan sejuk sel dan tisu selalunya membetulkannya dengan pelindapkejutan dahulu, dan kemudian menyimpannya dalam nitrogen cecair. Pelindapkejutan penetapan adalah sangat penting untuk kesan pemeliharaan. Sel hidup atau tisu segar kaya dengan air. Apabila pelindapkejutan, selalunya bahagian sel atau tisu yang bersentuhan langsung dengan cryoprotectants (terutamanya apabila pelindapkejutan dengan nitrogen cecair) dibekukan dan ditetapkan terlebih dahulu, dengan itu membentuk "cangkang", yang menghalang pembekuan dan penetapan pusat. bahagian sel. Oleh itu, apabila membuat analisis mikro X-ray, selalunya didapati terdapat kristal ais di tengah sel yang lebih besar. Untuk mengelakkan perkara ini berlaku, bahan dengan takat lebur lebih tinggi daripada nitrogen cecair tetapi suhu pengeringan yang lebih rendah daripada 806c digunakan sebagai agen penyejuk. Terdapat banyak bahan sedemikian, tetapi yang paling mudah didapati ialah propana pekat (takat didih-42.120c, takat lebur-187.10c, berat molekul-44.1), yang mempunyai kelajuan penyejukan terpantas. Tetapi kelemahannya adalah mudah terbakar.
Mikroskop biologi boleh meletakkan gentian otot pada bingkai khas, dan apabila gentian otot menguncup ke fasa tertentu dan perlu diperbaiki, muncung dimulakan serta-merta, supaya propana cecair disembur pada gentian otot untuk memadam dan memperbaiki. ia. Kemudian, gentian otot dikeluarkan bersama dengan rak dan dimasukkan ke dalam nitrogen cecair. Jika sel darah atau sel yang dipisahkan dibetulkan, sentrifus dahulu pada kelajuan rendah untuk menumpukan sel, pindahkan sel ke tiub kecil perak dengan kekonduksian haba yang baik, dan masukkan tiub kecil ke dalam propana cecair untuk pembekuan dan penetapan. Semasa membaiki pankreas tikus di makmal Hall, dua blok keluli telah disejukkan terlebih dahulu dengan helium cecair (atau nitrogen cecair), dan dua blok kuprum diletakkan di hadapan dan di belakang pankreas dengan playar, supaya makcik-makcik itu dipadamkan dan diperbaiki. Tisu atau sel boleh disimpan untuk masa yang lama selepas dipadamkan dan diperbaiki dan dipindahkan ke nitrogen cecair.
