Mikroskop biologi mengenai isipadu blok tisu
Mikroskopi biologi Setakat ini, penetapan sejuk, keratan ultranipis beku dan pengeringan beku adalah kaedah rutin untuk bahagian mikro x-ray tisu dan sel. Berikut adalah butiran kaedah ini:
Mikroskop biologi. Untuk mikroskop dengan pemeluwap, pemeluwap boleh digerakkan ke atas dan ke bawah untuk mencapai kecerahan sederhana. Di samping itu, apertur diod pemancar cahaya boleh ubah boleh ditukar untuk mencapai kecerahan 9b sederhana. Jika cahaya terang, pemeluwap boleh dinaikkan dengan sewajarnya dan apertur cahaya berubah boleh diperbesarkan dengan sewajarnya. Jika cahaya terlalu kuat, kondenser boleh diturunkan dengan sewajarnya dan apertur pancaran cahaya silang boleh dikurangkan dengan sewajarnya. Jika anda masih berasa mempesonakan dalam situasi ini, anda boleh memilih penapis yang sesuai dan meletakkannya pada pendakap di bawah pemeluwap. Dengan cara ini anda boleh mendapatkan kecerahan yang memuaskan hati anda. Sudah tentu, ia memerlukan tempoh latihan tertentu untuk mendapatkan pengalaman dalam melaraskan kedudukan atas dan bawah pemeluwap untuk mencapai saiz apertur berubah dan memilih penapis yang sesuai.
Isu yang sangat penting dalam mikroskop biologi ialah semasa proses mengumpul dan mengasingkan sel, selepas pengeringan beku dan pemasukan resin (FD), selepas membekukan pelet ultra-nipis, dan selepas pengeringan beku, kandungan 65 elemen setiap bahagian mesti dianalisis dengan sangat teliti, dan sama sekali Jangan merosakkan sel yang hendak dianalisis. Kerana analisis kawasan mikro sinar-X bukan sahaja melibatkan banyak langkah, tetapi juga memerlukan kos yang tinggi. Jika selepas masa yang lama dan beberapa langkah, sel yang dianalisis adalah sel yang rosak atau sel mati, sayang untuk membuat kesimpulan yang salah. Sebagai contoh, kardiomiosit yang diasingkan selepas rawatan kolagenase mempunyai dua bentuk, satu berbentuk batang panjang dan satu lagi bulat. Yang terakhir adalah sel mati yang rosak semasa pengasingan sel.
Mikroskopi Biologi Kandungan dan pengedaran elektrolit dalam kedua-dua jenis sel ini sangat berbeza. Na adalah sangat tinggi dan K sangat rendah dalam kardiomiosit bulat, dan kepekatan Ca dalam cawangan linear adalah sangat tinggi. Setelah disemak dengan kaedah analisis yang lain, terbukti bahawa Na dan rendah K dalam sel bulat dan tinggi ca dalam mitokondria adalah disebabkan oleh kerosakan pada membran sel semasa proses pemisahan sel. Kaedah penetapan sejuk sel dan tisu selalunya untuk memadam dan membetulkannya dahulu, dan kemudian menyimpannya dalam nitrogen cecair. Pelindapkejutan dan penetapan adalah sangat penting untuk kesan pemeliharaan. Sel hidup atau tisu segar kaya dengan air. Apabila pelindapkejutan, bahagian sel atau tisu yang bersentuhan langsung dengan kriogen (terutamanya apabila dipadamkan dengan nitrogen cecair) mula-mula dibekukan dan difikatkan, sekali gus membentuk "cangkang", yang menghalang bahagian tengah sel itu dihancurkan. dan tetap sejuk. Oleh itu, apabila melakukan analisis kawasan mikro garis X, selalunya didapati terdapat kristal ais di tengah sel yang lebih besar. Untuk mengelakkan perkara ini daripada berlaku, bahan dengan takat lebur yang lebih tinggi daripada nitrogen cecair tetapi kekeringan yang lebih rendah daripada -806c digunakan sebagai penyejuk hancur. Terdapat banyak bahan sedemikian, tetapi yang paling mudah dan paling murah ialah propana pekat (takat didih - 42.120c, takat lebur - 187.10c, berat molekul 44.1), dan kadar penyejukan juga paling cepat. Tetapi kelemahannya ialah ia mudah terbakar.
Mikroskop biologi boleh meletakkan gentian otot pada bingkai khas. Apabila penguncupan gentian otot mencapai fasa tertentu dan perlu diperbaiki, muncung dimulakan serta-merta untuk menyembur propana cecair ke gentian otot untuk memadam dan memperbaikinya. Kemudian gentian otot bersama bingkai dikeluarkan dan dimasukkan ke dalam nitrogen cecair. Jika sel darah atau sel yang dipisahkan dibetulkan, mula-mula sentrifus pada kelajuan rendah untuk menumpukan sel, pindahkan sel ke tiub perak kecil dengan kekonduksian terma yang baik, letakkan tiub dalam propana cecair dan beku untuk membaikinya. Apabila membaiki pankreas tikus di makmal Dewan, mula-mula menyejukkan dua blok keluli dengan cecair helium (atau nitrogen cecair), pasangkan dua blok kuprum dengan forsep, dan letakkannya sebelum dan selepas pankreas untuk memadam dan memperbaiki kelenjar rahim. . Tisu atau sel boleh dipadamkan dan diperbaiki dan kemudian dipindahkan ke nitrogen cecair untuk penyimpanan jangka panjang.
