Meningkatkan faedah mikroskopi multifoton pengimbasan laser
Mikroskopi multifoton pengimbasan laser adalah peningkatan besar berbanding mikroskop optik. Ia boleh memerhatikan struktur dalam sel hidup, sel tetap dan tisu, dan boleh mendapatkan struktur satah Z berbilang lapisan yang jelas dan tajam, iaitu bahagian optik, dari mana ia boleh membina Struktur pepejal tiga dimensi spesimen. Mikroskopi konfokal menggunakan sumber cahaya laser yang, selepas pengembangan, mengisi keseluruhan satah fokus belakang kanta objektif, dan kemudian melalui sistem kanta kanta objektif untuk menumpu ke titik yang sangat kecil pada satah fokus spesimen. Bergantung pada apertur berangka kanta objektif, diameter titik pencahayaan paling terang ialah kira-kira 0.25 ~ 0.8μm, dan kedalaman ialah kira-kira 0.5 ~ 1.5μm . Saiz tempat confocal bergantung pada reka bentuk mikroskop, panjang gelombang laser, ciri kanta objektif, tetapan status unit pengimbasan dan sifat spesimen. Mikroskopi medan mempunyai julat dan kedalaman pencahayaan yang besar, manakala mikroskopi confocal mempunyai pencahayaan terfokus yang difokuskan pada titik fokus pada satah fokus. Kelebihan paling asas mikroskop confocal ialah ia boleh melakukan pembahagian optik halus spesimen pendarfluor tebal (yang boleh mencapai 50 μm atau lebih), dan ketebalan bahagian adalah kira-kira 0.5 hingga 1.5 μm. Satu siri imej bahagian optik boleh diperolehi dengan menggerakkan spesimen ke atas dan ke bawah menggunakan motor stepper paksi-Z mikroskop. Pemerolehan maklumat imej dikawal dalam pesawat dan tidak akan diganggu oleh isyarat yang dipancarkan dari lokasi lain pada spesimen. Selepas mengalih keluar pengaruh pendarfluor latar belakang dan meningkatkan nisbah isyarat kepada hingar, kontras dan resolusi imej confocal dipertingkatkan dengan ketara berbanding imej pendarfluor bercahaya medan tradisional. Dalam banyak spesimen, banyak komponen struktur yang rumit dijalin untuk membentuk sistem yang kompleks, tetapi apabila bahagian optik yang mencukupi dapat dikumpulkan, kita boleh membina semula mereka dalam tiga dimensi melalui perisian. Kaedah eksperimen ini telah digunakan secara meluas dalam penyelidikan biologi untuk menjelaskan hubungan struktur dan fungsi yang kompleks antara sel atau tisu.
