Mikroskop pendarfluor menggunakan kaedah dan langkah berjaga-jaga
Kaedah penggunaan:
(1) Letakkan helaian bahan pada pentas pembawa.
(2) Hidupkan pengatur voltan mikroskop pendarfluor. Kemudian tekan kumpulan permulaan untuk menyalakan lampu UV tidak boleh dimatikan selama 15 minit, dan tidak boleh dimulakan semula selama 3 minit selepas ia dimatikan.
(3)Tukarkan penapis pengujaan kepada v, filem dichroic kepada v, pilih penapis penyekat 495 atau 475nm.
(4) Pilih pendarfluor uvFL40, uvFL100 yang menerima mikroskop kanta objektif.
(5) Tambah minyak bukan pendarfluor pada slaid, pertama 40 x, dan kemudian 100 x pemfokusan mikroskop. Tunjukkan pendarfluor.
(7) Kerana bahan pendarfluor oleh penyinaran ultraungu dengan pertumbuhan pendarfluor secara beransur-ansur lemah dari semasa ke semasa, jadi pemeriksaan mikroskopik harus kerap menukar bidang pandangan.
(8) juga boleh menggunakan bahan mikroskop pembesaran rendah uvFL10 atau uvFL20 (dengan pembesaran rendah tanpa menambah minyak bukan pendarfluor).
Kaedah rakaman imej pendarfluor:
Imej pendarfluor dilihat oleh mikroskop pendarfluor, satu adalah dengan ciri morfologi, yang kedua adalah dengan warna dan kecerahan pendarfluor, dalam menilai keputusan, kedua-duanya mesti digabungkan dengan penghakiman yang komprehensif. Keputusan direkodkan mengikut penunjuk subjektif, iaitu, melalui pemerhatian visual oleh pekerja. Sebagai pemerhatian kualitatif umum, pada asasnya boleh dipercayai. Dengan perkembangan teknologi dan sains, pada tahap yang berbeza-beza, penggunaan penunjuk objektif untuk merekodkan keputusan penghakiman, seperti penggunaan spektrofotometer sel, penganalisis imej dan instrumen lain. Walau bagaimanapun, keputusan yang direkodkan oleh instrumen ini juga mesti digabungkan dengan pertimbangan subjektif.
Teknologi fotografi mikroskop pendarfluor sangat diperlukan untuk merakam imej pendarfluor, kerana pendarfluor mudah pudar dan lemah, untuk merekodkan hasil fotografi dengan serta-merta. Kaedahnya pada asasnya sama seperti mikrografi biasa. Hanya perlu menggunakan filem fotografi berkelajuan tinggi seperti ASA200 ke atas atau 24. ke atas. Kerana cahaya ultraviolet pada kesan pecah pendarfluor, seperti penanda FITC, dalam penyinaran cahaya ultraviolet 30s, kecerahan pendarfluor dikurangkan sebanyak 50%. Oleh itu, kelajuan pendedahan terlalu perlahan untuk menangkap imej pendarfluor. Mikroskop pendarfluor penyelidikan am mempunyai peranti sistem mikrofotografi separa automatik atau automatik sepenuhnya.
Langkah berjaga-berjaga:
(1) Beroperasi mengikut ketat dengan keperluan manual kilang mikroskop pendarfluor, jangan ubah prosedur sewenang-wenangnya.
(2) Pemeriksaan hendaklah dijalankan di dalam bilik gelap. Selepas memasuki bilik gelap, sambungkan bekalan kuasa, nyalakan lampu merkuri tekanan ultra tinggi selama 5-15minit, tunggu sehingga sumber cahaya memancarkan cahaya yang kuat untuk stabil dan mata disesuaikan sepenuhnya dengan bilik gelap dan kemudian mula memerhati spesimen.
(3) Untuk mengelakkan kerosakan pada mata daripada cahaya ultraungu, cermin mata pelindung hendaklah dipakai semasa melaraskan sumber cahaya.
(4) semak masa setiap kali untuk 1 ~ 2h adalah sesuai, lebih daripada 90min, lampu merkuri tekanan ultra tinggi keamatan bercahaya secara beransur-ansur menurun, pendarfluor lemah; spesimen yang disinari oleh cahaya ultraungu 3 ~ 5min, pendarfluor juga lemah dengan ketara; oleh itu, * tidak boleh lebih daripada 2 ~ 3j.
(5) hayat sumber cahaya mikroskop pendarfluor adalah terhad, spesimen harus pemeriksaan berpusat, untuk menjimatkan masa dan melindungi sumber cahaya. Apabila ia panas, perlu ditambah penyejukan kipas, mentol baru perlu direkodkan dari awal penggunaan masa. Apabila lampu dipadamkan dan ingin digunakan semula, mentol mesti disejukkan dengan secukupnya sebelum dinyalakan. Sumber cahaya harus dielakkan beberapa kali.
(6) Perhatikan spesimen sejurus selepas pewarnaan, kerana pendarfluor akan beransur-ansur berkurangan dari semasa ke semasa. Jika spesimen diletakkan dalam beg plastik polietilena yang disimpan pada 4 darjah, ia boleh melambatkan masa pendarfluor melemah dan menghalang penyejatan agen pengedap.
(7) Kriteria penilaian untuk kecerahan pendarfluor: secara amnya dibahagikan kepada empat tahap, iaitu, 'satu' - tiada atau pendarfluor lemah yang boleh dilihat. '+' - hanya pendarfluor yang boleh dilihat dengan jelas. '+ +' - kelihatan dengan terang
