Kaedah pengesanan mikroskop pendarfluor
mikroskop pendarfluor
Mikroskopi pendarfluor ialah alat asas untuk sitokimia imunofluoresensi. Ia terdiri daripada komponen utama seperti sumber cahaya, sistem plat penapis, dan sistem optik. Ia menggunakan panjang gelombang cahaya tertentu untuk merangsang spesimen dan mengeluarkan pendarfluor, yang diperbesarkan melalui sistem objektif dan kanta mata untuk memerhati imej pendarfluor spesimen (Rajah 1).
(1) Sumber cahaya
Pada masa kini, lampu merkuri tekanan ultra tinggi 200W biasanya digunakan sebagai sumber cahaya. Ia diperbuat daripada kaca kuarza, dengan bentuk sfera di tengah dan sejumlah merkuri diisi di dalamnya. Semasa operasi, pelepasan antara dua elektrod menyebabkan merkuri tersejat, dan tekanan di dalam sfera meningkat dengan cepat. Apabila merkuri tersejat sepenuhnya, ia boleh mencapai 50-70 tekanan atmosfera standard, yang biasanya mengambil masa kira-kira 5-15 minit. Pencahayaan lampu merkuri tekanan ultra tinggi adalah hasil daripada pelepasan antara elektrod, yang secara berterusan tercerai dan mengurangkan molekul merkuri dan mengeluarkan foton. Ia memancarkan cahaya ultraviolet dan biru ungu yang kuat, yang mencukupi untuk merangsang pelbagai bahan pendarfluor, oleh itu, ia digunakan secara meluas dalam mikroskop pendarfluor.
Langkah berjaga-jaga untuk menggunakan mikroskop pendarfluor
(1) Patuhi arahan kilang mikroskop pendarfluor dengan tegas dan jangan ubah atur cara sewenang-wenangnya.
(2) Pemeriksaan hendaklah dijalankan di dalam bilik gelap. Selepas memasuki bilik gelap, sambungkan kuasa dan nyalakan lampu merkuri tekanan ultra tinggi selama 5-15 minit. Selepas sumber cahaya memancarkan cahaya yang kuat dan stabil, mata harus menyesuaikan diri sepenuhnya dengan bilik gelap sebelum mula memerhati spesimen.
(3) Untuk mengelakkan kerosakan UV pada mata, cermin mata pelindung hendaklah dipakai semasa melaraskan sumber cahaya.
(4) Masa pemeriksaan hendaklah 1-2 jam setiap kali. Jika melebihi 90 minit, keamatan cahaya lampu merkuri tekanan ultra tinggi secara beransur-ansur berkurangan dan pendarfluor menjadi lemah; Spesimen yang terdedah kepada sinaran ultraungu selama 3-5 hari
Selepas min, pendarfluor juga berkurangan dengan ketara; Jadi, tempoh maksimum tidak boleh melebihi 2-3 jam.
(5) Jangka hayat sumber cahaya mikroskop pendarfluor adalah terhad, dan spesimen perlu diperiksa secara berpusat untuk menjimatkan masa
Jimat masa dan lindungi sumber cahaya. Apabila cuaca panas, kipas elektrik perlu ditambah untuk menghilangkan haba dan menyejukkan. Apabila menggantikan mentol lampu baharu, masa penggunaan hendaklah direkodkan dari awal. Apabila lampu dimatikan dan anda ingin menggunakannya semula, anda mesti menunggu mentol lampu sejuk secukupnya sebelum menyalakannya. Elakkan menyalakan sumber cahaya beberapa kali sehari.
(6) Perhatikan spesimen sejurus selepas pewarnaan, kerana pendarfluor akan beransur-ansur lemah dari semasa ke semasa. Jika spesimen disimpan dalam beg plastik polietilena pada 4 darjah, ia boleh melambatkan masa pengecilan pendarfluor dan menghalang penyejatan agen pelekap.
(7) Kriteria penghakiman untuk kecerahan pendarfluor secara amnya dibahagikan kepada empat tahap, iaitu "satu" - tidak atau pendarfluor lemah yang boleh dilihat. "+" - Hanya pendarfluor yang boleh dilihat kelihatan. ++- Kelihatan dengan pendarfluor terang. "+++" - Pendarfluor yang boleh dilihat dan mempesonakan.
