Bagaimana Mikroskopi Pendarfluor berbeza daripada Mikroskopi Laser Konfokal
Mikroskop pendarfluor
1. Mikroskop pendarfluor menggunakan cahaya ultraungu sebagai sumber cahaya untuk menerangi objek yang diperiksa untuk menjadikannya mengeluarkan pendarfluor, dan kemudian memerhatikan bentuk dan lokasi objek di bawah mikroskop. Mikroskopi pendarfluor digunakan untuk mengkaji penyerapan dan pengangkutan bahan dalam sel, serta pengedaran dan kedudukan bahan kimia. Sesetengah bahan dalam sel, seperti klorofil, boleh pendarfluor selepas disinari oleh sinar ultraungu; sesetengah bahan itu sendiri tidak boleh pendarfluor, tetapi jika ia diwarnai dengan pewarna pendarfluor atau antibodi pendarfluor, ia boleh pendarfluor selepas penyinaran dengan sinar ultraungu. Mikroskopi pendarfluor adalah Salah satu alat untuk penyelidikan kualitatif dan kuantitatif mengenai bahan tersebut.
2. Prinsip mikroskop pendarfluor:
(A) Sumber cahaya: Sumber cahaya memancarkan cahaya pelbagai panjang gelombang (daripada ultraungu kepada inframerah).
(B) Sumber cahaya penapis pengujaan: menghantar cahaya dengan panjang gelombang tertentu yang boleh menyebabkan spesimen berpendarfluor, sambil menyekat cahaya yang tidak berguna untuk merangsang pendarfluor.
(C) Spesimen pendarfluor: Umumnya diwarnakan dengan pigmen pendarfluor.
(D) Penapis menyekat: Menyekat cahaya pengujaan yang tidak diserap oleh spesimen dan secara selektif menghantar pendarfluor. Beberapa panjang gelombang dalam pendarfluor juga dihantar secara selektif. Mikroskop yang menggunakan cahaya ultraungu sebagai sumber cahaya untuk menyebabkan objek yang diterangi menjadi pendarfluor. Mikroskop elektron pertama kali dipasang pada tahun 1931 di Berlin, Jerman oleh Knorr dan Hallowska. Mikroskop ini menggunakan pancaran elektron berkelajuan tinggi dan bukannya pancaran cahaya. Memandangkan panjang gelombang aliran elektron jauh lebih pendek daripada cahaya, pembesaran mikroskop elektron boleh mencapai 800,000 kali, dan had resolusi minimum ialah 0.2 nanometer. Mikroskop elektron pengimbasan, yang mula digunakan pada tahun 1963, membolehkan orang ramai melihat struktur kecil pada permukaan objek.
3. Skop aplikasi: Digunakan untuk membesarkan imej objek kecil. Biasanya digunakan dalam pemerhatian biologi, perubatan, zarah mikroskopik, dll.
mikroskop confocal
1. Mikroskop confocal menambah kanta separa reflektif pada laluan optik cahaya yang dipantulkan, yang membiaskan cahaya yang dipantulkan yang telah melalui kanta ke arah lain. Terdapat penyekat dengan lubang jarum pada fokusnya, dan lubang jarum terletak Di titik fokus, di belakang penyekat, adalah tiub pengganda foto. Boleh dibayangkan bahawa cahaya yang dipantulkan sebelum dan selepas fokus cahaya pengesanan melalui sistem confocal ini dan tidak boleh difokuskan pada lubang kecil, dan akan disekat oleh penyekat. Jadi apa yang diukur oleh fotometer ialah keamatan cahaya yang dipantulkan pada fokus.
2. Prinsip: Mikroskop optik tradisional menggunakan sumber cahaya medan, dan imej setiap titik pada spesimen akan diganggu oleh pembelauan atau cahaya berselerak dari titik bersebelahan; mikroskop confocal pengimbasan laser menggunakan pancaran laser untuk membentuk sumber cahaya titik melalui lubang jarum yang menerangi untuk menerangi bahagian dalam spesimen. Setiap titik satah fokus diimbas, dan titik bercahaya pada spesimen diimej pada lubang jarum pengesanan, yang diterima titik demi titik atau baris demi baris oleh tiub photomultiplier (PMT) atau peranti gandingan sejuk (cCCD) di belakang pengesanan. lubang jarum, dan dengan cepat Imej pendarfluor terbentuk pada skrin monitor komputer. Lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pengesan adalah konjugat relatif kepada satah fokus kanta objektif. Titik pada satah fokus difokuskan pada lubang jarum pencahayaan dan lubang jarum pelepasan pada masa yang sama. Titik di luar satah fokus tidak akan digambarkan pada lubang jarum pengesanan. Ini diperolehi Imej Konfokal adalah keratan rentas optik spesimen, mengatasi kelemahan imej kabur dalam mikroskop biasa.
3. Bidang aplikasi: Melibatkan perubatan, penyelidikan saintifik haiwan dan tumbuhan, biokimia, bakteriologi, biologi sel, embriologi tisu, sains makanan, genetik, farmakologi, fisiologi, optik, patologi, botani, neurosains, biologi marin dan sains bahan , sains elektronik , mekanik, geologi petroleum, mineralogi.
