Penyediaan dan Pemerhatian Sampel Biologi untuk Mikroskop Elektron
Resolusi mikroskop bergantung pada panjang gelombang cahaya yang digunakan. Mikroskop elektron, yang muncul pada tahun 1933, mencapai resolusi yang jauh lebih tinggi daripada mikroskop optik kerana penggunaan pancaran elektron dengan panjang gelombang jauh lebih pendek daripada cahaya kelihatan sebagai sumber cahaya. Sumber cahaya yang berbeza juga menentukan satu siri perbezaan antara mikroskop elektron dan mikroskop optik.
Berdasarkan perbezaan dalam prinsip pengimejan pancaran elektron dan cara ia bertindak ke atas sampel, mikroskop elektron moden telah berkembang menjadi pelbagai jenis. Pada masa ini, yang paling biasa digunakan ialah mikroskop elektron penghantaran dan mikroskop elektron pengimbasan. Yang pertama mempunyai jumlah pembesaran yang boleh berubah antara 1000-10000000 kali, manakala yang kedua mempunyai jumlah pembesaran yang boleh berubah antara 20-300000 kali. Eksperimen ini terutamanya memperkenalkan penyediaan dua jenis sampel mikroskop, mikroskop elektron penghantaran dan mikroskop elektron pengimbasan.
2, Peralatan
1. Strain Escherichia coli condong.
2. Larutan atau reagen: pentil asetat, asid sulfurik pekat, etanol kontang, air steril, 2% natrium fosfotungstat (pH 6.5-8.0) larutan berair, 0.3% larutan polivinil formaldehid (larut dalam kloroform), sitokrom c, plasmodium asetat 2.
3. Instrumen atau alatan lain termasuk mikroskop optik biasa, jaring kuprum, corong porselin, bikar, piring petri, penitis steril, pinset steril, pin, slaid kaca, plat mengira, mesin salutan vakum, pengering titik kritikal, dsb.
3, langkah-langkah operasi
(1) Penyediaan dan Pemerhatian Sampel untuk Mikroskopi Elektron Penghantaran
1. Rawatan mesh logam
Sampel mikroskop optik diletakkan di atas slaid kaca untuk pemerhatian. Walau bagaimanapun, dalam cermin penghantaran, kerana elektron tidak dapat menembusi kepingan kaca, bahan mesh hanya boleh digunakan sebagai pembawa, biasanya dirujuk sebagai mesh pembawa. Mesh pembawa boleh dibahagikan kepada pelbagai spesifikasi kerana bahan dan bentuk yang berbeza, antaranya mesh tembaga dengan 200-400 mesh (bilangan lubang) biasa digunakan. Mesh tembaga perlu dirawat sebelum digunakan untuk mengeluarkan sebarang kotoran dan memastikan ia bersih, jika tidak, ia akan menjejaskan kualiti filem sokongan dan kejelasan foto spesimen. Jaringan kuprum 400 mesh yang digunakan dalam eksperimen ini boleh dirawat dengan kaedah berikut: pertama, rendam dan apungkan dengan pentil asetat selama beberapa jam, kemudian bilas beberapa kali dengan air suling, dan akhirnya rendam dan apungkan mesh kuprum dalam etanol kontang untuk dehidrasi. Jika mesh tembaga masih tidak bersih selepas kaedah di atas, ia boleh direndam dalam asid sulfurik pekat cair (1:1) selama 1-2 minit, atau direbus dalam larutan NaOH 1% selama beberapa minit, dibilas beberapa kali dengan air suling, dan kemudian dehidrasi dalam etanol kontang untuk kegunaan kemudian.
