Hubungan antara pembesaran dan resolusi dalam mikroskopi rendaman minyak
Objektif mikroskop yang digunakan dalam penyelidikan mikrobiologi biasanya tiga jenis: pembesaran rendah (1 {{2 0}} x), pembesaran tinggi (4 0 x), dan pembesaran minyak (100x). Terdapat juga perkataan 'oi' (rendaman minyak) yang menunjukkan bahawa ia mempunyai pembesaran tertinggi di antara ketiga -tiga. Bergantung pada pembesaran kanta mata yang digunakan, objek yang diperiksa boleh diperbesarkan 1000-1600 kali. Apabila digunakan, perbezaan antara kanta rendaman minyak dan objektif lain adalah bahawa tidak ada lapisan udara di antara slaid kaca dan lensa objektif, tetapi lapisan minyak yang dipanggil sistem rendaman minyak. Jenis minyak ini sering dipilih sebagai minyak cedarwood kerana indeks biasannya n =1. 52, yang sama dengan kaca. Apabila cahaya melewati slaid kaca, ia boleh memasukkan kanta objektif secara langsung melalui minyak cedar tanpa pembiasan. Jika medium antara slaid kaca dan lensa objektif adalah udara, ia dipanggil sistem kering. Apabila cahaya melalui slaid kaca, ia dibiaskan dan bertaburan, dan jumlah cahaya yang memasuki lensa objektif jelas dikurangkan, yang mengurangkan pencahayaan bidang pandangan. Penggunaan cermin minyak bukan sahaja meningkatkan pencahayaan, tetapi juga terutamanya meningkatkan apertur berangka, kerana kecekapan pembesaran mikroskop ditentukan oleh apertur berangka. Aperture berangka yang dipanggil merujuk kepada produk separuh sinus sudut maksimum di mana cahaya diproyeksikan ke lensa objektif (dikenali sebagai sudut kanta) yang didarabkan oleh indeks biasan medium antara slaid kaca dan lensa objektif. Ia boleh dinyatakan oleh formula berikut: na=n × sin a, di mana na=aperture berangka; N=indeks refraktif medium; A=Separuh daripada sudut insiden maksimum, iaitu separuh sudut cermin. Oleh itu, semakin besar sudut di mana cahaya diproyeksikan ke lensa objektif, semakin besar kecekapan mikroskop, dan saiz sudut ini bergantung pada diameter dan panjang fokus lensa objektif. Sementara itu, had teoretikal A ialah 90 .. Sin90. "Oleh itu, apabila menggunakan udara sebagai medium (n =1), aperture berangka tidak boleh melebihi 1. Jika sudut kejadian cahaya adalah 120o dan separuh daripada sinusnya adalah sin60o =0. 87, maka: apabila menggunakan udara sebagai medium: na =1 × 0. 87=0. Apabila menggunakan air sebagai medium: na =1. 33 × 0. 87=1. 15; Apabila menggunakan asfalt sebagai medium: na =1. 52 × 0. 87=1. 32. Resolusi mikroskop merujuk kepada keupayaannya untuk membezakan jarak minimum antara dua mata. Ia berkadar secara langsung dengan apertur berangka lensa objektif dan berkadar songsang dengan panjang gelombang. Oleh itu, semakin besar aperture berangka lensa objektif, semakin pendek gelombang gelombang cahaya, semakin besar resolusi mikroskop, dan lebih jelas struktur halus objek yang diperiksa dapat dibezakan.
Oleh itu, semakin besar aperture berangka lensa objektif, semakin pendek gelombang gelombang cahaya, semakin besar resolusi mikroskop, dan lebih jelas struktur halus objek yang diperiksa dapat dibezakan. Oleh itu, resolusi tinggi bermakna jarak yang boleh dibezakan kecil, dan kedua -dua faktor ini berkadar songsang. Sesetengah orang biasanya menggambarkan resolusi sebagai berapa banyak mikrometer atau nanometer, yang sebenarnya membingungkan resolusi dengan jarak resolusi minimum. Resolusi mikroskop diwakili oleh jarak minimum yang dapat diselesaikan. Jarak minimum yang boleh membezakan antara dua mata ialah λ/2NA, di mana λ=panjang gelombang gelombang cahaya. Panjang purata gelombang cahaya yang boleh dilihat oleh mata telanjang ialah 0. 55 μ m. Jika aperture berangka adalah 0. 65 untuk lensa objektif kuasa tinggi, ia boleh membezakan jarak antara dua mata sebagai 0. 42 μ m. Walau bagaimanapun, jarak antara dua mata di bawah 0. Hanya dengan menggunakan kanta objektif yang lebih besar dengan aperture berangka yang lebih besar dapat resolusinya ditingkatkan. Sebagai contoh, apabila menggunakan cermin minyak dengan aperture berangka 1.25, jarak minimum antara dua mata yang boleh dibezakan ialah 0. 55/(2 × 1.25) =0 22 μ m. Oleh itu, kita dapat melihat bahawa jika lensa objektif kuasa tinggi dengan pembesaran 4 0 kali (Na =0. Jika cermin minyak dengan pembesaran sebanyak 90 kali (Na =1. 25) dan mata mata dengan pembesaran 9 kali digunakan, walaupun pembesaran total adalah 810 kali, jarak 0.22 μ m dapat dibezakan.
