Beberapa Nota dan Petua untuk Menggunakan Mikroskopi Kontras Fasa
Penggunaan Mikroskopi Kontras Fasa
1) Pasang peranti kontras fasa: keluarkan kanta pemeluwap mikroskop biasa, dan pasangkan kanta pemeluwap dengan diafragma anulus pada mikroskop yang sepadan; keluarkan kanta objektif biasa mikroskop, dan gantikannya dengan kanta objektif dengan plat fasa; gantikan kanta mata dengan kanta mata Fokus untuk mikroskop kontras fasa; penapis hijau khas (kadangkala tidak perlu) diletakkan di pintu masuk cahaya sumber cahaya.
2) Penjajaran dan fokus cahaya: Laraskan kanta mata pemfokus dan skru pelarasan ketebalan sehingga bulatan putih dan bulatan hitam dapat dilihat dengan jelas dalam medan pandangan. Bulatan hitam ditetapkan, dan bulatan putih boleh digerakkan dengan melaraskan skru pada peranti pemeluwap, supaya bulatan hitam dan bulatan putih bertepatan sepenuhnya. Tanggalkan kanta mata fokus dan gantikan dengan kanta mata asal mikroskop untuk diperiksa.
Analisis masalah dalam penggunaan mikroskop kontras fasa
1. Pengaruh ketebalan sampel Apabila melakukan pemerhatian kontras fasa, ketebalan sampel hendaklah 5 μm atau lebih nipis. Apabila menggunakan sampel yang lebih tebal, lapisan atas sampel sangat jelas, tetapi lapisan dalam akan menjadi kabur dan menyebabkan gangguan anjakan fasa. dan penyebaran cahaya.
2. Pengaruh kaca penutup dan kaca slaid Sampel mesti ditutup dengan kaca penutup, jika tidak cincin terang diafragma anulus dan gelang gelap plat fasa sukar untuk bertindih. Pemerhatian kontras fasa juga mempunyai keperluan yang tinggi pada kualiti kaca kaca slaid dan kaca penutup. Apabila terdapat calar, ketebalan tidak sekata atau tidak sekata, herotan gelang terang dan gangguan fasa akan berlaku. Di samping itu, apabila slaid terlalu tebal atau terlalu nipis, cincin terang diafragma anulus akan menjadi lebih besar atau lebih kecil.
3. Halo dan kesan pudar Dalam proses pengimejan mikroskop kontras fasa, apabila struktur tertentu menjadi gelap akibat kelewatan fasa, ia bukan kehilangan cahaya, tetapi hasil pengagihan semula cahaya pada satah imej. Jadi cahaya yang nampaknya hilang di kawasan gelap akan muncul sebagai halo terang di sekeliling objek yang lebih gelap. Ini adalah kelemahan mikroskopi kontras fasa, yang menghalang pemerhatian struktur halus, dan fenomena halo lebih serius apabila diafragma anulus sangat sempit. Satu lagi fenomena dalam mikroskopi kontras fasa ialah kesan teduhan, yang merujuk kepada kehilangan kontras di tepi kawasan yang lebih besar dengan kelewatan fasa yang sama apabila diperhatikan oleh kontras fasa.
4. Penyongsangan fasa Apabila n'n, kontras terang dan gelap imej adalah bertentangan, yang dipanggil penyongsangan fasa. Ia tidak dapat dikenali apabila perbezaan fasa δ=0, dan kontras menjadi lebih besar dengan peningkatan δ, dan penyongsangan fasa akan muncul apabila δ terus meningkat kepada nilai tertentu. Apabila menggunakan kanta objektif nilai penyerapan tinggi (kontras tinggi) 90 peratus, nilai transformasi ini adalah kira-kira 0.55λ, dan apabila menggunakan kanta objektif nilai penyerapan standard 70 peratus, ia adalah kira-kira 0.33λ . Objektif dengan nilai penyerapan yang lebih tinggi harus digunakan untuk menyelesaikan perbezaan laluan optik yang lebih kecil.
