Struktur asas mikroskop dan cara kanta minyak berfungsi
Mikroskop optik am moden menggunakan sistem dua kanta, kanta mata dan kanta objektif, untuk membesarkan imej, dan sering dirujuk sebagai mikroskop majmuk. Ia terdiri daripada dua bahagian utama: peranti mekanikal dan sistem optik. Dalam sistem optik mikroskop, prestasi kanta objektif adalah yang paling kritikal, yang secara langsung mempengaruhi resolusi mikroskop. Antara beberapa jenis kanta objektif yang biasa digunakan dalam mikroskop optik am, kanta minyak mempunyai pembesaran yang paling besar dan merupakan yang paling penting untuk penyelidikan mikrobiologi. Berbanding dengan kanta objektif lain, penggunaan kanta minyak adalah lebih istimewa, anda perlu menambah setitik minyak cermin antara slaid dan kanta, yang disebabkan terutamanya oleh dua aspek berikut:
1. meningkatkan kecerahan pencahayaan pembesaran cermin minyak sehingga 100 Χ, pembesaran kanta besar itu, jarak fokusnya sangat pendek, diameternya sangat kecil, tetapi keamatan cahaya yang diperlukan adalah yang terbesar. Daripada membawa spesimen slaid melalui cahaya, kerana ketumpatan media yang berbeza (dari slaid ke udara, dan kemudian ke dalam kanta), beberapa cahaya akan disebabkan oleh pembiasan atau pantulan total, tidak boleh memasuki kanta, mengakibatkan dalam penggunaan cermin minyak akan disebabkan oleh cahaya yang kurang, imej objek tidak kelihatan jelas. Jadi untuk tidak membuat cahaya melalui kehilangan, dalam penggunaan cermin minyak mesti ditambah antara cermin minyak dan slaid dengan indeks biasan kaca (n=1.55) serupa dengan cermin minyak. (biasanya dengan minyak cedar, indeks biasannya n=1.52).
2. Meningkatkan resolusi mikroskop Resolusi atau kuasa penyelesaian mikroskop ialah keupayaan mikroskop untuk mengenali jarak minimum antara dua titik. Dari sudut fizikal, resolusi mikroskop optik dihadkan oleh fenomena gangguan dan prestasi kanta objektif yang digunakan. Kuasa penyelesaian D boleh dinyatakan seperti berikut: D=λ/2N.A, di mana λ=panjang gelombang gelombang cahaya; NA=nilai apertur berangka bagi kanta objektif. Sumber cahaya mikroskop optik tidak mungkin melebihi julat panjang gelombang cahaya kelihatan (0.4 - 0.7 μm), manakala nilai apertur berangka bergantung pada kanta objektif sudut mulut cermin dan biasan indeks medium antara slaid dan kanta, yang boleh dinyatakan seperti berikut: NA=n × sin yang merupakan separuh daripada sudut tuju maksimum cahaya. Ia bergantung pada diameter dan panjang fokus kanta objektif, secara amnya, dalam amalan, maksimum hanya boleh mencapai 120 O dan n untuk indeks biasan medium. Kerana indeks biasan minyak cedar (1.52) daripada indeks biasan udara dan air (masing-masing, 1.0 dan 1.33) menjadi lebih tinggi, jadi minyak cedar sebagai kanta dalam slaid antara medium cermin minyak boleh mencapai nilai apertur berangka (NA biasanya dalam 1.2-1.4) lebih tinggi daripada kanta pembesaran rendah, kanta pembesaran tinggi, seperti cermin kering (NA lebih rendah daripada 1. 0). Jika purata panjang gelombang cahaya kelihatan ialah 0.55 μm, kanta pembesaran tinggi dengan apertur berangka 0.65 hanya boleh membezakan objek pada jarak tidak kurang daripada 0. 4 μm, manakala resolusi cermin minyak boleh menjadi kira-kira 0.2 μm.
