Mikroskop biofluoresensi tegak
Prinsip mikroskopi pendarfluor adalah menggunakan sumber cahaya titik yang sangat efisien (seperti lampu merkuri tekanan ultra tinggi) untuk memancarkan panjang gelombang cahaya tertentu (seperti cahaya ultraviolet 3650 λ atau cahaya biru ungu 4200 λ) Kemudian, ia ditapis oleh penapis menyekat (atau menekan) di belakang lensa objektif dan diperhatikan melalui kesan pembesar mata mata.
Penapis menyekat mempunyai dua fungsi: Pertama, ia menyerap dan menyekat cahaya pengujaan dari memasuki kanta mata untuk mengelakkan campur tangan dengan pendarfluor dan merosakkan mata; Yang kedua adalah untuk memilih dan membenarkan pendarfluor tertentu melewati, mempamerkan warna pendarfluor tertentu.
Mikroskop pendarfluor boleh dibahagikan kepada dua jenis berdasarkan prinsip laluan cahaya:
1. Mikroskop pendarfluor penghantaran
Mikroskop pendarfluor yang lebih tua menggunakan perhatian untuk merangsang pendarfluor dengan meluluskan sumber cahaya pengujaan melalui bahan spesimen. Kelebihannya adalah pendarfluor yang kuat pada pembesaran yang rendah, tetapi kelemahannya adalah bahawa pendarfluornya berkurangan dengan peningkatan pembesaran. Oleh itu, ia hanya sesuai untuk mengamati bahan spesimen yang lebih besar.
2. Mikroskop pendarfluor cahaya jatuh
Lampu pengujaan jatuh dari lensa objektif ke permukaan spesimen, menggunakan kanta objektif yang sama seperti kondensor pencahayaan dan kanta objektif untuk mengumpul pendarfluor.
Splitter rasuk warna dua (cermin dichroic) perlu ditambah ke laluan optik, yang membentuk sudut 45 darjah dengan paksi optik. Lampu pengujaan dicerminkan ke dalam lensa objektif dan memberi tumpuan kepada sampel. Pendarfluor yang dihasilkan oleh sampel, serta cahaya pengujaan yang dicerminkan dari permukaan lensa objektif dan kaca penutup, masukkan lensa objektif pada masa yang sama dan kembali ke splitter rasuk warna dua untuk memisahkan cahaya pengujaan dan pendarfluor. Lampu pengujaan sisa kemudian disekat oleh penyerapan penapis. Jika kombinasi penapis pengujaan yang berlainan, pemisah rasuk warna dua, dan penapis menyekat digunakan, mereka dapat memenuhi keperluan produk reaksi pendarfluor yang berbeza.
Kelebihan mikroskop pendarfluor ini adalah pencahayaan medan seragam, pengimejan yang jelas, dan pendarfluor yang lebih kuat dengan pembesaran yang lebih besar.
