Prinsip dan Operasi Mikroskop Darkfield
① Mikroskop medan gelap mempunyai hentian legap di tengah pemeluwapnya. Ia menghalang cahaya pencahayaan langsung daripada memasuki kanta objektif; hanya cahaya yang dipantulkan dan dibelaukan oleh spesimen yang dikumpulkan. Akibatnya, latar belakang medan pandangan kelihatan gelap manakala tepi spesimen cerah. Mikroskop ini boleh mendedahkan zarah halus sekecil 4–200 nm, dengan resolusi sehingga 50 kali lebih tinggi daripada mikroskop medan terang biasa.
② Prinsip Mikroskop medan gelap diubah suai daripada mikroskop optik konvensional berdasarkan kesan Tyndall. Pemeluwap medan gelap menghalang pancaran pusat daripada sumber cahaya supaya cahaya tidak boleh bergerak lurus ke atas melalui spesimen ke dalam objektif. Sebaliknya, cahaya dialihkan untuk menerangi spesimen secara serong. Spesimen memantulkan atau menyerakkan cahaya kejadian, dan cahaya yang tersebar memasuki objektif, mencipta latar belakang gelap merentasi seluruh bidang pandangan.
③ Skop Penggunaan Mikroskopi medan gelap biasanya digunakan untuk memerhati spesimen lutsinar yang tidak ternoda. Spesimen sedemikian mempunyai indeks biasan yang hampir dengan medium sekeliling dan sukar untuk dibezakan di bawah pencahayaan medan terang biasa. Pencahayaan medan gelap menambah baik kontras antara spesimen dan latar belakang. Ia boleh mengesan zarah hingga 4–200 nm. Walau bagaimanapun, ia hanya menunjukkan kehadiran, pergerakan dan ciri permukaan objek dan tidak dapat menyelesaikan struktur dalaman yang halus.
④ Prosedur Operasi
(1) Pasangkan pemeluwap medan gelap pada pemegang pemeluwap mikroskop.
(2) Gunakan sumber cahaya terang. Elakkan cahaya langsung memasuki objektif; lampu mikroskop khusus biasanya digunakan.
(3) Letakkan setitik minyak cedar di antara pemeluwap dan slaid spesimen. Ini menghalang pantulan dalaman keseluruhan cahaya pada permukaan pemeluwap, yang sebaliknya akan gagal untuk menerangi spesimen untuk pemerhatian medan gelap.
(4) Naikkan atau turunkan kondenser untuk memfokuskan pancaran cahaya konnya pada spesimen. Jika pemeluwap dilengkapi dengan pergerakan mendatar dan kawalan pemusatan, lakukan pemusatan terlebih dahulu untuk menjajarkan paksi optik pemeluwap dengan tepat dengan mikroskop. (5) Pilih objektif yang dipadankan dengan pemeluwap, laraskan fokus, dan tunjukkan imej spesimen sasaran.
